1. Explica la siguiente frase: “Los genes clonados suministran suficiente ADN para determinar la
secuencia de genes”. ¿Con qué tema ya estudiado lo vinculas? Fundamenta tu respuesta.
Esta frase significa que mediante la amplificación del gen de interés utilizando la técnica de PCR, se
puede obtener una secuencia exacta de nucleótidos para dicho gen. Esto se relaciona, como hemos
nombrado antes, con la técnica de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), que produce
grandes cantidades de segmentos de ADN en un tubo de ensayo, más rápida y económicamente que
mediante el cultivo de bacterias.
La PCR consiste de cuatro pasos o etapas: la desnaturalización, en la cual se separa el ADN en cadenas
individuales por calor para el análisis; el alineamiento, en la que el ADN desnaturalizado se organiza;
la extensión, donde se amplía el ADN; y la electroforesis, etapa en la que el ADN se analiza mediante
una corrida eléctrica por precipitación de las moléculas según sus tomas. Además, en la PCR
intervienen tres componentes principales, los cuales son: el ADN que contiene la secuencia de
nucleótidos que se desea sintetizar, dos secuencias cortas de ADN llamadas “iniciadores” y ADN
polimerasa. Esta última, enlaza los nucleótidos para formar cada nueva molécula de una cadena
individual de ADN, sintetizando el ADN que se encuentra entre los puntos de enlace de los iniciadores.
De esta manera, se multiplica el ADN y amplían los STR (“short tandem repeat”) para estudiar los
caracteres particulares que se desean aislar.
2. ¿Cuáles son las semejanzas y las diferencias de los pasos de la receta de ingeniería genética y
los pasos de la biblioteca de ADN?
En primer lugar, la receta básica de la ingeniería genética consiste de los siguientes pasos:
- La experiencia comienza con la identificación de un carácter deseable en el organismo de
origen, para encontrar el gen de interés. Se continúan aislando dicho gen, purificándolo de
otros componentes celulares y caracterizarlo (conocer su secuencia de nucleótidos).
- Se combina el gen con otro componentes que actúan en su activación y expresión, y
marcadores que permitirán identificar la presencia del vector en el organismo receptor.
- Se transfiere el gen de interés ahora inserto en el plásmido a las células bacterianas para que
ocurra la transformación bacteriana, que permite la entrada del ADN a través de la membrana
del microrganismo.
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