Summary
Volledige samenvatting van practicum celcultuur
- Course
- Institution
Dit document bevat de volledige samenvatting van het practicum van het vak celcultuur en immunochemie.
[Show more]
Seller
Follow
Bi0med
Reviews received
Content preview
Experiment 1: immunochemie- Biotinyleren van een antigen, opzuiveren, proteïne bepaling
- Opstellen van een standaardcurve
Men gaat de concentratie bepalen van 2 onbekende stalen dmv EIA (= enzym immuno assay)
Soort EIA = hier: competitief indirect heterogeen systeem:
- Competitief: ongelabelde Ag moet in competitie gaan met het gelabeld Ag* voor de
bindingsplaats op het Ab
o Ongelabelde analyt in het testmonster wordt gemeten door zijn vermogen om te
concurreren met gelabeld Ag voor een beperkt aantal Ab bindingsplaatsen
- Niet-competitief: Het reactiemengsel omvat typisch een overmaat gemerkt antilichaam
- Indirect: wel een secundair antilichaam
- Direct: geen secundair antilichaam
- Heterogeen: ook componenten aanwezig die niet binden aan het antilichaam
- Homogeen: enkel antigenen aanwezig die kunnen binden op het antilichaam
Uitleg:
Je krijgt een plaat met een antilichaam op, dat specifiek is voor het antigen dat je wilt bepalen.
In staal A en B zitten verschillende componenten (ook sommige die niet binden aan je antilichaam
want heterogeen systeem). Het antigen zal dan binden aan het antilichaam maar dit kan je niet zien.
Je zal nu biotine toevoegen dat kan binden op het antigen, en dan een ABC complex toevoegen
(avidine-biotine complex). Dit complex zal op de biotine binden. Op het ABC complex zit een enzym:
horse radish peroxidase.
Dan ga je een substraat (kleurloos) toevoegen. Waneer dit bindt met het enzym wordt er een
gekleurd product gevormd. Dus wanneer het antigen aanwezig is, zal er een kleuring te zien zijn.
Deze kleur is echter niet stabiel, dus we voegen er nog een stof aan bij waardoor het stabiel geel
wordt.
We willen echter onze eigen onbekenden niet aanpassen, en ze zijn bovendien ook heterogeen.
Daarom zullen we met een aparte stock werken, met gekende concentratie, van hetzelfde antigen.
Deze zullen we dan wel biotinyleren.
We laten dan onze onbekende A en B in competitie treden met het antigen met gekende
concentratie dat wel gebonden is aan biotine.
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller Bi0med. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $3.70. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
51662 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 15 years now