Summary
Samenvatting gastles ELISA (celcultuur)
- Course
- Institution
Volledige samenvatting van de les van ELISA. Bevat alle info uit de les en is dus zeker voldoende om te slagen op dit deel van het examen celcultuur en immunochemie.
[Show more]
Seller
Follow
Bi0med
Reviews received
Content preview
ELISA= enzyme-linked immuno sorbent assay of enzyme immuno assay (EIA)
- Is een immunochemische reactie gebaseerd op de specifieke binding tussen Ag en Ab
Antilichamen
- Proteïnen die worden gesecreteerd door B-lymfocyten (in vertebraten)
- Gebruikt voor diagnose van ziekten (infectieuze ziekten, auto-immuun ziekten, oncologie,
stofwisselingsziektes, …)
- Ook gebruikt voor fysiologische condities te onderzoeken of om in te schatten of een
bepaalde therapie aanslaat
- Biologische functie:
o Neutralisatie van virussen of toxines
o Het opsonisatie mechanisme
o Het complementsysteem
o Anti-lichaam celgemedieerde cytotoxiciteit
- Monoklonaal antilichaam: binding met slechts één epitoop
- Polyklonaal antilichaam: binding met meerdere epitopen met verschillende structuren
Blootstelling aan bepaalde ziektekiem proliferatie van sepcifieke B-cel met herkenning voor dit
antigen (= primaire respons) aanmaak van geheugen B-cellen secundaire respons veel
hardere immuun respons
IgA
IgD
IgE
IgG Belangrijkste humorale component tegen
binnendringende pathogenen. Kan de placenta
passeren om de foetus immunitet te geven
IgM Expressie op oppervlka van B-cellen in een
pentamere vorm meer zeer hoge aviditeit.
Elimineert pathogenen in de vroege stadia van
door B-cellen gemedieerde umuniteit voordat
er voldoende IgG is
Structuur antilichamen
- 2 zware en 2 lichte ketens
- Y vorm met 2 variabele regio’s (FAB) en 1 constant (FC) gedeelte
o Op variabele regio’s kunnen antigenen binden
- Glycosilatie bepaalt de structuur van het FC en bepaalt de FC receptoren die kunnen binden
ter recrutering van effector cellen
- Amino terminus en carboxyl terminus
- Karakteristieken
o Bivalent, heterodimeer
o Disulfide binding
o Linker regio laat beweging toe
, Karakteristieken
- Gevoeligheid
o Detectielimiet (concentratie in pg/ml) betere detectielimiet = lagere limiet
o Afhankelijk van Ka
o Bepaalt de hoeveelheid antigen dat aanwezig moet zijn om een signaal te geven
- Specifiteit
o De mogelijkheid om een specifiek antigen te meten zonder interferentie
o Cave: kruisreactie, contaminanten
- Precisie
o Hoe groot is afwijking/variatie op metingen kleinere standaard afwijking = beter
o Variabiliteit van het testen
Herhaalbaarheid: zelfde persoon, zelfde pipet zelfde resultaten
Reproduceerbaarheid: versch. persoenen en omgeving zelfde resultaten
- Nauwkeurigheid
o Hoe dicht meetresultaten liggen bij de echte waarde
o Afhankelijk van precisie
Specifiteit van het antilichaam
- Niet bepaald door volledige antilichamen: bepaald door Complementaire Determining Regio
o Hypervariabele regio’s
- Epitoop: klein, toegankelijk deel van een macromolecuul dat herkend kan worden door Ab, B-
cellen en T-cellen
- Paratoop : antigeenbindende plaats: onderdeel van Ab dat antigen herkent en eraan bindt
- Idiotype: gedeeld kenmerk tussen groep immunoglobuline‐ of T‐celreceptormoleculen
(TCR) op basis van antigeenbindingsspecifiteit
- Idiotoop :
Wat bepaald de binding tussen epi- en paratoop?
Verzameling ‘zwakke’ niet-covalente bindingen bepalen affiniteit tussen epi- en paratoop
- Waterstof bruggen: Chemische binding waarbij een
waterstof atoom (positief geladen) van een bepaald
molecule wordt aangetrokken door de electronegativiteit ve ander molecule
- Van der Waals krachten: krachten tussen niet‐ gebonden atomen of moleculen
- Hydrofobe binding: De aantrekkingskracht tussen moleculen door de positionering van niet‐
hydrofiele delen van twee twee moleculen
- Electrostatische (Ionische) binding: Valentie binding
tussen twee atomen, aangetrokken door electrostatische krachten, transfer van één of
meerdere elektronen tussen twee atomen
Factoren die de antilichaam-antigen binding beïnvloeden:
1. Temperatuur
De optimale temperatuur voor AgAb reactie zal afhangen van de chemische aard van de epitoop, par
atoop en het type
bindingen dat betrokken is bij hun interactie. De vorming van waterstofbruggen is bijvoorbeeld vaak
exotherm. Deze
bindingen zijn stabieler bij lagere temperatuur en kunnen belangrijker zijn bij het omgaan met koolhy
draatAgs.
2. pH
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller Bi0med. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $3.80. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
64438 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now