Class notes
Tema 2C: Modificacions post transcripcionals
- Course
- Institution
Apunts de classe (Apunts de classe)
[Show more]
Seller
Follow
mariaisamat
Content preview
TEMA 2C: MODIFICACIONS POST-TRANSCRIPCIONALS:Cap 5’, cua poliA 3’, splicing, edició
Esquema diferencies mRNA procariota i eucariota
1. CAP I POLI-A (NOMÉS mRNA)
1.1 Adició del CAP en 5’
Consisteix en una 7-metilguanosina unida a l'extrem 5’ del nucleòtid +1 mitjançant un
pont 5'-5 trifosfat. És afegit per una guaniltransferasa específica de l'mRNA transcrit
creixent (quan té uns 30 nt de llarg)
Poden donar-se 3 metilacions, que són seqüencials i s'han de donar sempre en l'ordre
donat:
* Si el primer nucleòtid és A, pot estar metilat en la posició N6 de la base. Es un mecanisme
de protecció que no forma part del CAP. 1
A l’inici de la transcripció, es dona la fosforilació de la Ser 5 de la subunitat β’ de la RNAPII,
el que permet la unió de l’enzim que forma el CAP i la seva formació.
És una espècie de control de qualitat:
a) Si no ha funcionat bé l’inici no es col·loca el CAP.
b) Si el CAP està mal col·locat no hi ha elongació.
Un cop s’ha afegit el CAP es forra per una serie de proteïnes CBC. Un cop s’ha portat
al citoplasma les proteïnes CBC es canvien per el factor d’inici de traducció (traducció
depenent de CAP).
1
Present en tots els eucariotes menys els mrna dels organuls (que es semblant als bacteris ) i als polivirus.
, 1.2 Funcions del CAP
- CBP: protecció envers les endonucleases que actuen 5’ → 3’ i transport de l’mRNA al citoplasma.
- eIF-4E: factor d’iniciació que reconeix el CAP i marca l’inici de la traducció a partir de la ciclació del mRNA.
- Eif-4G: factor d’iniciació que interacciona amb la poli-A binding protein. Tot això permet l’inici de la traducció.
1.3 Formació de la cua poli-A en 3’
En eucariotes, les seqüències que indiquen la terminació de la transcripció no han estat identificades (en general
perquè les seqüències 3' són bastant heterogènies).
→ El 80% dels mRNA eucariòtics tenen cues poli A de 200nt a l'extrem 3'. Exemples sense cua poli A són les histones,
snRNAS i snoRNAS.
Les cues de poliA s'afegeixen als pre-mRNA en 2 reaccions enzimàtiques on un complex multimèric de proteïnes
(CPSF, CSTF, CF-I, CF-II, PAP) s'encarrega del reconeixement, tall i poliadenilació de l'mRNA.
1) TALL: el transcrit és tallat als 15-25nt de passar la seqüència (AAUAAA) i 50nt abans d’una seqüència rica en G+U,
provocant la terminació de la transcripció.
• CPSF (Cleavage & Polyadenylation Specificity Factor): reconeix la seqüència AAUAAA i recluta la PAP
• CSTF (Cleavage Stimulation Factor): reforça la unió de tot el complex i reconeix la seqüència rica en G+U
• CFI + CFII (Factors de tall): tallen l'mRNA a uns 10-30 pb de la seqüència consens AAUAAA molt conservada. No es
coneixen les endonucleases que col·laboren en el tall.
Si s’eliminés la seqüència AAUAAA no es donaria ni el tall ni la poliadenilació.
2) ADICIÓ DE LA CUA POLI-A: permetent transportar l'mRNA al citoplasma.
o PAP (PolyAdenylation Polymerase) és reclutada per CPSF (encara que per si sola s'uneixi feblement a l'RNA) i posa
al voltant de 10 A en l'extrem 3' (moment en què es dissocia la CPSF4 i la PAP contínua fins 100-200). La CPSF té un
comportament similar a la subunitat sigma de la transcripció.
o PAB II (PoliAdenylate Binding Protein) s'uneix a la cua poliA en el citoplasma i controla la seva longitud i l'activació
de PAPA.
o PABP s'uneix a la cua poliA en el citoplasma i la protegeix de les exonucleases.
3) TERMINACIÓ EN EUCARIOTES
Una exonucleasa 5 '→ 3' reconeix el 5' (generat en el tall específic
que passa per afegir la cua poli-A) i degrada el mRNA perseguint la
RNAP (I o III) a major velocitat que la de la
transcripció.
Quan arriba a la RNAP (a les proteïnes accessòries que s'han unit a
el domini CTD de la subunitat β'), la polimerasa salta i s'acaba la
transcripció.
NO hi ha contacte exonucleasa amb RNAp, sino amb les proteïnes
que s’han anat unint. Això és degut a que està tot coordinat, s’ha
de acabar la transcripció quan ja s’han fet tots els pasos, per tant
la hexonucleasa comprovarà les marques que s’han fet abans de
acabar la transcripció.
En el cas de les histones, es forma un “hairpin” que és detectat per un riboenzim (snRNA) que talla i genera un
extrem 5’, que és degradat de manera similar al cas anterior.
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller mariaisamat. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $5.89. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
67474 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now