Class notes
Tema 4B: Recombinació
- Course
- Institution
Apunts de classe (Apunts de classe)
[Show more]
Seller
Follow
mariaisamat
Content preview
TEMA 4B: RECOMBINACIÓ8. RECOMBINACIÓ
Recombinació il·legítima: No depèn de l’homologia de seqüències i és típica de transposons.
Recombinació homòloga: Típica de la meiosi, conjugació i transducció, i en què 2 seqüències tenen la
mateixa seqüència i recombinen.
És imprescindible en la meiosi, ja que sinó s’anirien acumulant mutacions i comprometria la viabilitat.
8.1. Recombinació procariota
Els bacteris ries sí fan recombinacions; no fan meiosi però si recombinen en la conjugació o
transducció. En la transformació també es dóna lloc la recombinació però en menor mesura.
Quan parlem del factor F (episoma), es dóna recombinació
homòloga.
a. Model de holliday
Tenim 2 cromosomes homòlegs, en què dues cadenes (que poden
ser les dues + o les -) són tallades. El tall farà que es creuin les
cadenes i s’uneixin. El que passarà és que el punt que anomenem
branca o entrecreuament migrará. Es mourà, i quan més ho faci
major serà el fragment que recombini.
Un cop ha migrat, el dúplex (les dos cadenes de DNA) s’ha de
resoldre i separar-se. Ho fa la resolvasa, que produeix un tall i
uneix les cadenes, de manera que se separen les cadenes de
manera horitzontal o vertical, generant dos resultats diferents.
Es veu com, a partir d’un sol procés, es generen diferents resultats
depenent del lloc del tall. Si ens fixem, les cadenes no son
complementàries dins la recombinació.
b. Model chi de recombinació circular
Es produeix de la mateixa manera que en el cas anterior. Hi ha un tall en una
de les cadenes de cada cercle (+ o -), que produirà que es creuin. Tindrem un
intermediari Chi, el qual es donarà la volta, i també en funció del tall en
resultarà una integració (es fusionaran els dos cercles) o recombinació.
, 8.1.1 Proteïnes que intervenen en la recombinació procariota
1. RecA
És un component del sistema SOS.
- És una proteïna de 40 kDa amb capacitat de polimeritzar ràpidament de forma
cooperativa. S’uneix sobre ssDNA o dsDNA molt danyat.
- Acaba fent un filament sobre el DNA de milers de monòmers que s’estructuren en una
hèlix dextrogira de 6.2 monòmers de RecA i una alçada per volta de RecA sobre el DNA
de 95 Å. Això ve a ser unes 2.8 voltes de DNA.
El que de veritat passa és que cada monòmer esta unint 3 pb, és a dir, que 3·6,2=18.6 nucleòtids en 95
Å: tenim el DNA desfet.
Està canviant la T (twist), ja que desfà directament la doble hèlix.
RecA introdueix una cadena d’una de les dues cadenes sobre la doble hèlix (pel solc menor)
formant-ne una triple → una de les cadenes senzilles és introduïda de tal manera que està girant en
sentit antihorari. De l’altra doble cadena (introduïda pel solc major), una de senzilla s’estira pel 5’. Així,
RecA enrotlla la doble hèlix diferent a com ha entrat i en substitueix una de les dues per la senzilla.
Necessita, doncs, el ssDNA i un extrem 3’.
2. RecBCD
És una endonucleasa que talla el DNA per a poder fer el canvi de
cadenes i generar el 3’ lliure per la RecA. També és del sistema SOS.
És un heterotrimer: amb helicasa 3’ a 5’ i activitat nucleasa.
o RecB: helicasa 3’→5’ i endonucleasa
o RecCD: helicasa 5’→3’.
La subunitat C detecta les seqüències Chi i fa que el trímer s’aturi.
1. El trímer reconeix el dsDNA rom i les helicases separen
les cadenes gastant ATP.
2. RecB degrada les 2 cadenes (especialment la 3’→5’):
3. L’exonucleasa 3’→5’ degrada fins que detecta la seqüència Chi (GCTGGTGG), que es
troba en la cadena 5’ – 3’ cada 5kb.
4. Quan arriba a la seq Chi, canvia la prioritat de degradació d’una a l’altra cadena.
5. L’exonucleasa 5’→3’ genera l’extrem de ssDNA d’ per la RecA.
3. RuvABC
És un complex heterotrímer que migrarà la branca i resoldrà l’heterodúplex,
és a dir, l’entrecreuament entre la cadena simple i la doble.
També s’indueix pel sistema SOS.
Realment no es un trímer tal qual, sinó que es compon, per un costat, de
RuvA, que és un
tetràmer que manté estable l’estructura de Holliday.
Per altra banda, qui migra la branca són dos hexàmers RuvB que giren en el
sentit antihorari i desplacen el punt d’entrecreuament de manera longitudinal
gastant ATP.
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller mariaisamat. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $5.89. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
67474 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now