Summary
Samenvatting Algemene Weefselleer En Weefselleer Van De Kauworganen Deel 1
- Course
- Institution
Deze samenvatting is gebaseerd op de slides, colleges en cursustekst.
[Show more]
Seller
Follow
THKleuven1
Reviews received
Content preview
WEEFSELLEERSAMENVATTING
H1
Cel (nt)
- Vorm volgt functie
- Macroscopie
• Bestuderen met blote oog
• Anatomie
- Microscopie
• Bestuderen met microscoop
• Histologie
- Wegname van weefsels en cellen
• Operatief
o Van organen/weefsels
o 3 soorten
§ Levend
¨ = cytologie
¨ Steriel werken (!)
§ Dood
¨ Invriezen
¨ Fixeren
• Biopsie
• Afzonderlijke cellen
o Aspiratie van weefsel
o Punctievloeistof hol orgaan
o Lichaamsvochten
§ Sputum
¨ Slijm + speeksel
¨ In luchtwegen
§ Urine
§ Bloed
o Schraapsel
Anatomopathologisch onderzoek (nt)
- Belang bij wetenschappelijk onderzoek en kliniek
- Doel
• Diagnose stellen
- Kennis van
• Histologie
o Studie microscopische structuur
§ Van biologisch materiaal
§ In weefselverband
• Cytologie
o Studie van losse cellen
o Niet in weefselverband
1
,Microscopie
- Resolutie
• Kleinste afstand tussen 2 elementen
o Waarbij ze afzonderlijk zichtbaar zijn
• EM: 0,1nm
• LM: 0,2 µm
• Formule
0,61𝜆
𝑅=
𝑁𝐴
o NA
§ Numerieke apertuur
§ Hoeveel licht lens opvangt
• Lichtmicroscopie: 10-7
• Elektronenmicroscopie: 10-10
Lichtmicroscopie
- Soorten
• Wit licht
o Fotonen
o Transmissiemicroscopie
o Weerkaatsingmicroscopie
o Eigenschappen
§ Vergrotingen
¨ Oculair (20x)
¨ Lens (10x)
§ Preparaat/staal
¨ Klein/dun genoeg
¨ Weefsel kleuren
• Fluorescent licht
o Fluoroforen
o Belichten met golflengte
§ λ moet optimaal zijn
§ Fluorfoor vangt licht op (λ1) " wordt geëxciteerd " straal licht uit (λ2) " λ1<λ2
" E1>E2
o Met
§ Chemische verbinding
§ Fluorescente eiwitten
¨ Green fluor proteïne (GFP)
- Weefselbewaring
• Doel
o Voorkomen van afbraakprocessen
§ Afbraakprocessen bij
¨ Gebrek aan zuurstof
¨ Gebrek aan afvoer van afbraakproducten
¨ Vrijkomen van verteringsenzymen
• Fixeren of invriezen
o Afremmen verteringsprocessen en groei
o Behouden van macromoleculaire structuur
o Fixeren
§ Met fixatievloeistof
¨ = Fixator
¨ 5x volume van weefsel
¨ Bv. formol
§ Crosslinking
¨ Vormen covalente bindingen
¨ Met N-terminale groepen van eiwitten
¨ Vasthechten eiwitten aan cytoskelet
2
, § Verlies van enzymatische werking (vaak)
§ Duur
¨ 2-24uur
¨ Afhankelijk van grootte materiaal en methode
§ Voordelen
¨ Goede bewaring
o Invriezen
§ In N2 (l)
§ = fresh frozen
§ Moet snel gebeuren
¨ Met OCT-oplossing + onderkoeld isopentaan
§ Voor kleine weefsels
§ Afremmen enzymatische processen
¨ Bij 37°C weer functie
§ Voordelen
¨ Kan snel
¨ RNA/DNA betere kwaliteit (dan fix)
§ Nadelen
¨ Snelle afbraak van weefsel
¨ Morfologie minder mooi (dan fix)
o Daarna snijden + kleuren
§ Snijden
¨ Na fixatie te zacht
· Harder maken met paraffine
à Verloop
p Materiaal mengen met alcoholoplossing van verschillende
concentraties " alcohol verwijderen " met tolueen of xyleen
" H2O verwijderen uit materiaal " toevoeging paraffine "
opstijven " aansnijden op vriesmicrotoom
¨ Coupes
· Na aansnijden
· 5-10 µm dik
§ Kleuren
¨ Kleurstoffen
· Vaak hydrofiel
¨ Verloop
· Verwijderen paraffine " toevoeging xyleen " oplossen paraffine "
toevoeging alcohol " uitspoelen xyleen " toevoeging H2O " kleuring
¨ Haematoxyline-eosine kleuring(H&E)
· Standaard basis kleuring
· Haematoxyline
3
, à Blauw
p Eigenlijk kleurloos
p Oxidatieproduct is blauw
à Basisch
à Bindt aan zuren
à M.n. in kern
· Eosine
à Rood
à Zuur
à Bindt aan basen
à M.n. in cytoplasma en collageen
¨ Empirische kleuringen
· Ontdekt door trial and error
· Trichoomkleuring
à Mengsel van verschillende kleurstoffen
p Bv. haematoxyline
à Rood
p Keratine
p Spiervezels
à Blauw of groen
p Collageen
p Bot
à Roze of rood
p Cytoplasma
à Bruin of donkerrood
p Kernen
· Zilverkleuring
à Met zilveroplossingen
à Zichtbaar maken
p Bv. DNA en eiwitten
p Door afzetting zilverpartikels op structuur
à Visualisering van reticulline vezels (in lymfeknopen)
¨ Histochemische kleuringen
· Door chemische reactie
à Tussen weefsel en verbinding in kleuroplossing
· Bv. Periodic Acid Schiff (PAS)
à Aantonen koolhydraten
à Reagens
p Periodaat (IO4) + Schiffs reagens
p Periodaat oxideert glycol tot aldehyden
p Schiffs reagens kleurt aldehydegroepen magentarood
à Amylase
p Verteert glycogeen
r Geen kleuring
p Verteert geen glycoproteïnen
r In mucines
r Wel kleuring
¨ Enzym-histochemische kleuringen
· Enzymactiviteit
à Bepaalt kleuring
à Moet na weefselvoorbereiding bewaard zijn gebleven
· Peroxidase kleuring
à Peroxidase
p In meeste cellen + peroxisomen
à Toevoeging waterstofperoxide
p Oxideren van substraat (bv. DAB)
p Ontstaan bruine neerslag
4
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller THKleuven1. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $8.02. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
53068 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now