Summary
Samenvatting Celkweek
- Course
- Institution
Samenvatting van heel de cursus + notities tijdens de les
[Show more]
Seller
Follow
amberdams
Reviews received
Content preview
1 InleidingOrgaancultuur volledige organen of intacte orgaanfragmenten kweken.
Celcultuur cellen verwijderen van orgaan vooraleer men ze in een cultuur brengen.
In vitro cellen gekweekt buiten het lichaam.
In vivo gebruikt van volledig levend organisme.
Weefselkweek kloneren van planten onder steriele condities
Genetisch gemodificeerde planten: kenmerk wordt doorgegeven aan volgende
generatie.
Callus= ongedifferentieerde cellen.
1.1 Arabidopsis Thaliana/ zandraket
- Genoom volledig gekend
- Ontwikkeling en groei goed gekarakteriseerd
Floral dip= transformatie met agrobacterium tumefaciens om vreemd DNA in plantencel te brengen.
Gebruik: resistentie in plant te bouwen.
1.1.1 Agrobacterium tumefaciens
- Gram negatieve bacterie
- Staafvormig
- Veroorzaakt kroongalziekte
- Bevat TI (Tumor Inducerend) plasmide
2 Hoe brengt men cellen in cultuur?
Dierlijke cellen
- weefsel → cellen
Primaire cultuur - hechten aan oppervlak
- delen en groeien
Hoe?
Explant cultuur Enzymatische dissociatie
2.1 Primaire cultuur
2.1.1 Explant cultuur (biopten)
Stukjes weefsel op glas/speciaal behandeld plastiek → onderdompelen in medium → individuele
cellen hechten en groeien.
2.1.2 Enzymatische dissociatie
Proces versnellen door toevoegen proteolytische enzymen (trypsine, collagenase, pronase).
Enzymen lossen matrix op die cellen bij elkaar houdt → suspensie van individuele cellen → in
cultuurflessen waar ze gaan delen en groeien.
AD Labcluster 3FBT: Celkweek 1
, 2.1.3 Cellijnen
ATCC= American Type Culture Collection
MCF-7= borstkankercellijn
Uitwisseling tussen laboratoria → problemen met contaminatie, verwisseling en vermenging.
2.2 Subculturen
Gehechte cellen - confluente cellen
combinatie met EDTA →
Proteolytische enzymen breken EWbindingen → cellen
loskomen van groeiopp
Serum stoppen van proteolytische reactie
celschraper: cellen fysisch verwijderen
Celsuspensie
van groeiopp.
- passage: cellen splitsen
Verdunde celsuspensie - passage nummer
- beperk voor sommige cellijnen
Confluent= wanner cellen gegroeid zijn en het volledige beschikbare cultuuroppervlak bedekt is.
EDTA:
- Enkel gebruikt om cellen los te maken
- Minder destructief dan trypsine (breekt EWbindingen af die cellen met cultuuropp. verbindt)
- Bind calcium (nodig bij binding)
2.3 Groeipatroon
Lag – log – plateau – veroudering/celdood
Rust/Lagfase= opstart, duur afh. van celtype, dichtheid, medium en
voorbehandeling.
Logfase= hoogste metabole activiteit
Plateau fase= stationaire fase= confluentie
Cellen best splitsen aan het einde van de logfase.
2.4 Celcultuur systemen
Adherente cellen Getransformeerde cellen
Hechtingsafhankelijke cellen Niet hechtingsafhankelijke cellen
Monolaag culturen Suspensieculturen
Normale cellen Verandering van intrinsieke eigenschappen
Speciaal weefselkweek behandelde flessen Roterende flessen/ erlenmeyer
T-flessen, roterende flessen Constant schudden → actief blijven cellen
Microtiterplaat Moeilijk in schatten wanneer cellen doorgezet
AD Labcluster 3FBT: Celkweek 2
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller amberdams. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $6.97. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
56326 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now