Samenvatting Biochemie en Proteomics 2e jaar Saxion
11 views 0 purchase
Course
Biochemie (L.20788)
Institution
Saxion Hogeschool (Saxion)
Book
Protein Purification
Een complete uitleg per leerdoel met goede uitleg van de verschillende begrippen en processen die nodig zijn om het vak "Biochemie en Proteomics" in het 2e jaar te kunnen halen.
Naar welke elektrode zullen de eiwitten bewegen bij SDS page? Leg uit.
De eiwitten bewegen naar de positieve elektrode omdat ze zelf negatief geladen zijn.
Geef de vijf verschillende ingrediënten die in de sample buffer aanwezig zijn en leg uit
wat hun functie is.
Tris/HCL buffer, die ervoor zorgt dat de eiwitten hun lading verliezen en ontvouwen.
SDS denatureert de eiwitten en maakt ze lineair.
B-mercapoethanol verbreekt de zwavelbruggen, waardoor de eiwitten maximaal
ontvouwen.
Glycerol zorgt ervoor dat het monster onderin de slotjes zakt.
Broomfenolblauw geeft het verloop van de elektroforese aan, zodat je weet wanneer je de
run moet stoppen om te voorkomen dat de eiwitten van de gel lopen.
Waarom moet je na het starten van de elektroforese 5 tot 10 minuten de blauwe band
van de monsters in de gaten houden?
- Of de eiwitten wel gaan migreren. Is dit niet het geval dat is het contact met de
elektrode niet goed.
- Om te kijken wanneer je eiwitmonster bij de running gel is aangekomen zodat het
voltage verhoogt kan worden.
Verklaar de gasvorming die optreedt tijdens de elektroforese bij de electroden.
Er zit zuurstof en waterstof bij de elektroden wat zorgt voor elektrolyse. Als er geen bubbels
te zien zijn is het niet goed.
Leg uit hoe een stabiele pH gradiënt wordt verkregen bij IEF, en wat de functie hiervan
is.
Er kan een carrier amfolyt toegevoegd worden aan de gel voor pH gradiënt stabilisatie.
Carrier amfolyten zijn moleculen met zowel een zuur als basegroep die aan de gel worden
toegevoegd. Een pre run is wel noodzakelijk.
Wat kun je manipuleren of toevoegen aan je homogenaat om de oplosbaarheid van je
eiwitten te beïnvloeden?
- pH veranderen
- zoutconcentratie veranderen
- a polaire oplosmiddelen toevoegen
Waarin kan de homogenisatiestrategie bij het isoleren van een oplosbaar
cytoplasmatisch eiwit uit bijv. leverweefsel verschillen van de strategie bij het isoleren
van intacte organellen?
Het weefsel moet eerst kapot gemaakt worden om losse cellen te krijgen. Het is dan
belangrijk dat de organellen intact blijven.
Op welke 3 manieren kun je eiwitten laten precipiteren?
- Verhogen zoutconcentratie
- Toevoeging van apolaire oplosmiddelen
- Variatie in pH
Waarom lossen eiwitten slecht op bij een hele lage zoutconcentratie?
Doordat het eiwit hydrofoob is, zal het niet oplossen maar neerslaan.
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller kevinbooij. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $5.68. You're not tied to anything after your purchase.
