100% satisfaction guarantee Immediately available after payment Both online and in PDF No strings attached
logo-home
Toepassingen van genetische technieken in menselijke genetica $7.01   Add to cart

Exam (elaborations)

Toepassingen van genetische technieken in menselijke genetica

 7 views  0 purchase
  • Course
  • Institution
  • Book

Toepassingen van genetische technieken in menselijke genetica

Preview 1 out of 2  pages

  • October 18, 2021
  • 2
  • 2021/2022
  • Exam (elaborations)
  • Questions & answers
avatar-seller
Toepassingen van genetische technieken in menselijke genetica: een overzicht



1. Kloneren van DNA

Kloneren van DNA kan gebruikt worden om een stuk DNA te amplificeren, maar meestal is PCR
hiervoor gemakkelijker. Waar het wel heel vaak voor gebruikt wordt, is om genen tot expressie
te brengen. Een voorbeeld hiervan is het opzuiveren van een eiwit. Dit eiwit kan dan in bacteriën
tot expressie worden gebracht, en daarna worden opgezuiverd. Een ander voorbeeld is het tot
expressie brengen van bepaalde eiwitten in eukaryote cellijnen. Die cellijnen kunnen dan in vitro
bestudeerd worden. Zo kan je b.v. een ionenkanaal in een cellijn tot expressie brengen, en het
daarna elektrofysiologisch via patch-clamping gaan bestuderen. Bij expressieklonering wordt de
coderende sequentie voor het eiwit steeds in een vector gekloneerd tot een recombinant DNA
construct. Dat construct wordt in een gastheer gebracht.

2. Blotting technieken

Blotting technieken gaan de aanwezigheid van nucleïnezuur na op de blot, via hybridisatie.
Southern en Northern blotting worden nog weinig gebruikt; de techniek is bijna altijd vervangen
door (reverse transcriptase) PCR gebaseerde technieken. Bij Southern blotting wordt DNA op de
blot gebonden, en het kan gebruikt worden voor het nagaan van bepaalde mutaties, b.v. RFLP
(hoofdstuk 4). Bij Northern blotting wordt RNA gebonden op, nagaan van expressie op RNA
niveau.

Western blotting is een blot techniek waarbij eiwitten worden gebonden op een blot. De
techniek wordt gebruikt voor het nagaan van expressie op eiwitniveau via antilichamen op de
blot. Vermits dit geen techniek is voor nucleïnezuren, wordt de techniek in deze cursus niet in
detail behandeld.



3. Microarrays

Er zijn twee belangrijke soorten microarrays. Een eerste soort bevat probes die verspreid zitten
over het volledige genoom. Op die soort wordt genomisch DNA van een patiënt gehybridiseerd.
Op basis van de resultaten kunnen CNV’s in het genoom worden opgespoord. Een tweede soort
microarrays bevat probes voor alle gensequenties van het mens genoom. Op die array wordt
RNA gehybridiseerd. Op die manier kan je het expressiepatroon van alle menselijke genen
(transcriptoom) bepalen, van b.v. een weefsel van een proefdier, een cellijn, etc.

4. Polymerase kettingreactie

PCR is een universele techniek, met vele toepassingen. Het zorgt voor amplificatie van korte
stukjes DNA. PCR is heel vaak de eerste stap in veel analysetechnieken, bv bij mutatiedetectie in
patiënten. Vaak wordt eerst een stukje geamplificeerd via PCR, en daarna de sequentie bepaald
via Sanger sequencing. PCR werkt alleen op DNA, maar via een reverse transcriptase tussenstap
is het ook bruikbaar voor RNA.

5. QPCR (kwantitatieve of realtime PCR)

QPCR is een speciale soort van PCR, die via een speciaal PCR apparaat wordt uitgevoerd. Met
deze techniek kan je nauwkeurig de concentratie van DNA (of RNA via reverse transcriptase)
meten. De techniek kent in de menselijke genetica dan ook vooral toepassingen bij

1

The benefits of buying summaries with Stuvia:

Guaranteed quality through customer reviews

Guaranteed quality through customer reviews

Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.

Quick and easy check-out

Quick and easy check-out

You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.

Focus on what matters

Focus on what matters

Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!

Frequently asked questions

What do I get when I buy this document?

You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.

Satisfaction guarantee: how does it work?

Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.

Who am I buying these notes from?

Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller lemmeslodders. Stuvia facilitates payment to the seller.

Will I be stuck with a subscription?

No, you only buy these notes for $7.01. You're not tied to anything after your purchase.

Can Stuvia be trusted?

4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)

66579 documents were sold in the last 30 days

Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now

Start selling
$7.01
  • (0)
  Add to cart