Flow cytometrie
Examenvragen :
• Je begrijpt het analyse- en sorteringsprincipe van een multilaser flowcytometer
• Je begrijpt en kan een overzicht geven van de belangrijkste toepassingen van
flowcytometrie in de diagnostiek en in biomedisch onderzoek
• Definieer de term flowcytometrie
• Beschrijf welk type biologisch staal het meest geschikt is voor een flowcytometriche analyse
• Beschrijf welke kenmerken van een cel of partikel door een flowcytometer kunnen gemeten
worden (= optische vingerafdruk)
• Identificeer de 3 componenten (= hoofdonderdelen) van een flowcytometer (fluidica, optica
en electronica) en beschrijf hun respectievelijke functies
• Verklaar hydrodynamische focusering
• Beschrijf hoe lichtverstrooiing beinvloed wordt door de kenmerken van een cel of partikel
• Beschrijf elastische en niet-elastische lichtverstrooiing
• Beschrijf het gebruik van excitatie- en emissiespectra
• Herken verschillende manieren om flowcytometrische data voor te stellen
Klinische casus:
• 14-jarige jongen
• 10 dagen koorts, bleek in het aangezicht, algemene zwakte, diffuse erythema
• Klinisch onderzoek: splenomegalie (vergroting van de mild)
• Bloedstaal nemen: hemoglobine is normaal, witte BC normaal verdeeld en aantal
Actieve, opgeblazen cellen -> maligniteit
Heb je te maken met maligne cellen? Beste behandeling?
Met flowcytometer inzoomen op elke cel individueel
Elke cel brengt eiwitten op membraan tot expressie -> CD nummers
CD19 -> merker voor B-cel
CD34 -> voorloper hematopoetische stamcellen
flow cytometer: dot plot
1
, elke dot = 1 cel
Resultaat: jongen heeft acute lymfoïde leukemie
Flow cytometry jargon
PARAMETER
Een fysisch of chemisch kenmerk van een cel
o Cytoplasmatische korrelgrootte of kern-DNA-gehalte
Een fysische eigenschap, gemeten door een sensor
o Lichtverstrooiing of fluorescentie
Een fysische eigenschap van een cel-geassocieerd reagens
o Intrinsiek
o Extrinsiek, afhankelijk van de vraag of de eigenschap al dan niet kan worden
gemeten met behulp van sondes
Excitatie Proces waarbij E geabsorbeerd wordt
Exctincit coëfficiënt Effeciëntie waarmee opstische E geabsorbeerd wordt, afhankelijk van
(e) golflengte
Emissie Proces waarbij optische E terug vrijgesteld wordt
Quantum opbrengst Efficiëntie waarmee E wordt vrijgesteld (0-1), meestal als fluorescentie
(Q) Onafhankelijk van golflengte
Stokes shift Verschil in E tussen excitatie max en emissie max
Spectrum Verdeling van excitatie en emissie golflengtes
Flow cytometrie
-> cellen meten in vloeistof flow
-> meten van lichtsignalen
metrie : detectie van lichtsignalen, opgewekt ten gevolge van de
snelle doorgang
cyto : van afzonderlijke cellen doorheen het centrum van een, tot
een microscopisch kleine spot gefocuseerde lichtstraal
flow : wat mogelijk is door de hydrodynamische focusering van de
celsuspensiestroom in een laminaire geleidingsvloeistofstroom
2
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller AVL2. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $5.43. You're not tied to anything after your purchase.