Het gaat over scheidingsmethoden zoals chromatografie (HPLC, GC...) daarnaast gaat het ook over kwantificatiemethoden (externe, interne standaard en standaardadditie). ten slotte gaat het nog over elektroforese
LC kan op een breder terrein w toegepast
Niet beperkt door vluchtigheid of thermische
stabiliteit vd te analyseren componenten
Methanol = ideaal voor GC, heeft laag kookpunt
Ontbreekt een UV of fluorescentie activiteit
Riboflavine = geen kookpunt,
kan niet verdampen
UV actieve molecule
Onderaan bevindt zich een pomp die gaat vloeistof pompen,
auto sampler, detector (UV) fluorescentiedetector en flessen
die bovenaan staan zijn de mobiele fasen
Schema
HPLC:
Pomp, mobiele fase over de kolom
pompen
Kolom, chromatografische kolom
Injector, injecteren en mengen met
mobiele fase
Detecteren door detector, signaal
moet opgevangen worden
, Scheidingsprincipe:
Componenten in mengsel gescheiden obv hun verschil in affiniteit voor de stationaire en
mobiele fase
Kolom = stationaire fase
Eluens = mobiele fase
Op polariteit scheiden
- Polair houdt van polair
- Apolair houdt van apolair
Verdelingschromatografie:
Moleculen lossen op in de stationaire fase, evenwicht
tussen conc van de moleculen in de stationaire fase en
die in de mobiele fase
Component gaat zich verdelen over de stationaire en mobiele fase
Als ze bij de mobiele fase graag zitten dan komen ze er snel uit
Grootste deel bevindt zich in de stationaire fase (blauw)
Cs = stationaire fase
Cm = mobiele fase
K = evenwichtsconstante
K = (Cs/Cm)
Mobiele fase:
Moet goed gekozen worden voor chromatogram met
voldoende resolutie
Polariteit van het eluens heeft dus een grote invloed op de
scheiding
Potentiële mobiele fases (organische oplossingen)
Water is het meest polair
Cyclohexaan minst polair
Altijd samen met water (het is relatief goedkoop)
Isocratische elutie (= constante elutiesterkte)
Voorbeeld 80/20 MeOH/H2O
- De laatste component heeft veel tijdverschil voor deze eruit komt
Gradiënt elutie
- Samenstelling van mobiele fase wijzigen in functie vd tijd wordt minder polair, elutiesterkte
gaat veranderen) gaat van 75 min naar 30 min
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller melissamaris1. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $3.80. You're not tied to anything after your purchase.
