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Apuntes Biología Celular (102954): Microscopia electrónica
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Apuntes realizados a partir de las clases magistrales y presentaciones de clase.
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Biologia cel·lularTEMA 1 - MICROSCÒPIA ÒPTICA
El microscoscopio óptico es un aparato de observación de precisión. Utilizando una fuente de luz, la
combinación de varies lentes hace posible la obtención de una imagen invertida y aumentada de una
muestra que no sería visible a simple vista con el ojo humano. El microscopio óptico permite aumentar
hasta 1000 veces la muestra y tiene una resolución màxima teórica de 0.2 µm. Las estructuras o
elementos que esten por debajo de este límite de resolución no podrán ser observado con el microscopio
óptico y tendrán que ser analizados con el microscopio electrónico.
El microscopio permite visualizar aquello que con el ojo no podemos ( 0.2 mm). A partir de 250 nm
utilizamos el microscopio electrónico, a partir de 2nm,, como que no se ve muy bien, trabajamos con otros
instrumentos.
1.1. Elements del microscopi
PIE: Soporte del microscopio donde está incorporada la fuente de luz.
FUENTE DE LUZ: Bombeta de intensidad regulable que ilumina la muestra.
CONDENSADOR: Lente óptica convergente que concentra la luz sobre la preparación. La concentración
de la luz sobre la muestra se puede regular (luz más concentrada o más dispersa)
DIAFRAGMA: Disco obturador de diámetro variable que regula la cantidad de luz que llega a la
preparación.
PLATINA: Base plana donde se coloca la preparación. Consta de una pinza que permite sujetar la
muestra.
TORNILLOS MACROMÉTRICO Y MICROMÉTRICO: Mecanismos que permiten desplazar la platina
veticalmente, acercando o alejando la preparación del sistema óptico para enfocarla. El tornillo
macrométrico desplaza la platina rápidamente y a distancias grandes, para hacer un primer enfoque de la
muestra. El tornillo micrométrico desplaza la platina ligeramente, de manera casi imperceptible, para
terminar de ajustar el enfoque.
OBJETIVOS: Lentes ópticas convergentes conectadas al revolver y que reciben el haz de luz proveniente
de la preparación, creando una imágen realmente aumentada e invertida de la muestra. Los aumentos de
los objetivos varian entre 3.5x (panorámico) y 100x(inmersión). Cuando se trabaja con el objetivo de
inmersión hay que poner una gota de aceite de inmersión sobre la preparación, ya que tiene un índice de
refracción mayor que el aire existente entre la lente y la preparación, lo cual permite aprovechar mejor la
luz refractada por la muestra.
REVÓLVER: Mecanismo rotatorio que sostiene los objetivos y permite intercambiarlos fácilmente.
TUBO: Conduce el haz de luz desde el objetivo hasta el ocular.
OCULAR: Lente óptica situada en el extremo superior del tubo. Aumenta las imágenes producidas por los
objetivos dando una imágen aumentada y virtual. Lleva una indicación de aumento individual del ocular
( por ejemplo, 10x equivale a 10 aumentos).
, 1.2. Funcionament del microscopi òptic
1. La bombeta emite luz, que es de intensidad variable. Tan pronto como la encencemos las ondas de luz
se dispersan en dirección al condensador.
2. Las lentes del condensador recogen esta luz y la enfocan y concentran sobre la muestra.
3. La luz condensada atraviesa la muestra.
4. La luz es dispersada de nuevo en atravesar la muestra. El grado de dispersión y la cantidad de luz que
atraviesa la muestra viene determinada por el grueso y densidad de la muestra.
5. La lente del objetivo recoge la luz dispersada en función de las características de la muestra y la vuelve
a concentrar sobre la lente del ocular.
6. Finalmente, la lente del ocular proyecta en nuestro ojo la imágen magnificada e invertida de la muestra
iluminada.
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