DNA report, use as an example if you can't figure it out
21 views 0 purchase
Course
Practicum Biochemie
Institution
Universiteit Leiden (UL)
Feel free to use this report as an example for your DNA report. It's your 1st report of this study so it doesn't have to be perfect. I picked up a 7 here myself.
Naam: Xuan Su Naam partner: Karen Aalbers
Studentnummer: 2488841 Assistenten: Cleo Demeester,
Groep: 1D1 X Romeo Schrage
Datum: 15 oktober 2019
DNA:
Plasmiden
en
nucleases
, Samenvatting
Het doel was om de bacterie E. Coli (Escherichia Coli) te transformeren en het
daarmee resistent te maken tegen een antibioticum. Er is een plasmide uit stam W19
van E. Coli geïsoleerd en gezuiverd. De zuiverheid is bepaald door een
absorbantiewaarde-meting en het A260/A280-ratio was 1,9. Hieruit bleek dat er geen
of weinig sprake was van eiwitverontreiniging. Door een Uv-foto van de agarose-gel
na elektroforese werd geconcludeerd dat het plasmide DNA overeenkwam met het
referentieplasmide pCTB2. Door dit resultaat werd er bepaald dat de restrictie-
enzymen EcoRI en HindIII gebruikt gingen worden voor het transformatieproces. Op
twee LB-agarplaten werden er opnieuw E. Colibacteriën gekweekt. Ditmaal bevatten
de bacteriën het ampicillineresistentie-gen. Dit was omdat pCTB2 het
ampicillineresistentie-gen bevat en de competente bacteriecellen het DNA plasmide
met dit gen hebben opgenomen. Eén LB-agarplaat bevatte wel antibioticum, de
ander niet. De volgende dag zijn er 244 kolonies geteld die resistent waren tegen het
antibioticum. De andere agar-plaat was volledig bedekt met bacteriën. Er is berekend
dat 1 op de 3,8 x 106 bacteriën waren getransformeerd. Hieruit blijkt dat deze
methode niet erg efficiënt is geweest om de bacteriën te voorzien van een nieuwe
eigenschap.
Inleiding
In dit onderzoek is onderzocht of een bacterie, E. Coli, een nieuwe eigenschap krijgt
door plasmide DNA van een andere bacterie op te nemen. Een plasmide is
cirkelvormig DNA en is makkelijk overdraagbaar. Dit houdt in dat de plasmiden
makkelijk worden opgenomen in ander DNA en eigenschappen dus makkelijk
overdraagbaar worden. Een eigenschap die op die manier overgedragen kan worden
is resistentie tegen een bepaald antibioticum. Eerst werd het plasmide DNA
geïsoleerd vanuit stam W19. Dit werd gedaan door eerst een kolonie van W19 te
kweken in een LB-medium. Daarna werden de celwanden opengebroken, ook wel
lysis. Hierna zijn de overbodige cellen uit het LB-medium verwijderd. Toen werd er
bepaald hoeveel plasmide DNA er over was gebleven, dit wordt de
zuiverheidsbepaling genoemd. Dit is op twee manieren gedaan. Met het plasmide-
DNA werd een absorptiemeting gedaan en de opbrengst werd bepaald door middel
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller xuansu. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $3.25. You're not tied to anything after your purchase.
