Summary
Samenvatting immunologie 10
- Course
- Institution
Alles van hoofdstuk 10. Cursus + ppt.
[Show more]
Seller
Follow
fleurverroens
Content preview
ImmunologieImmunofluorescentie
Fluorescerende stof = fluorofoor = fluorochroom
Eigenschap= wnr bestraald w door licht, met een korte golflengte
licht uit zenden met langere golflengte. Excitatielicht en emissielicht.
Voorbeelden: Covid 19 is een colloidaal goud methode
Fluoresceïne (FITC): blauw groen
Rhodamine (RITC) en Texas Red: groen rood
Directe methode:
Merken van eiwitten met:
- FITC = fluoresceïne
iso-thio-cyanaat
- RITC = rhodamine
iso-thio-cyanaat
AL dat we toevoegen bij directe= speciaal omdat er meteen iets fluorisents aanhangt.
= conjugaat (Conjugaat bindt met ag)
Nadelen:
1) Door covalent binden met FITC op AL vermindert in meer of mindere mate de
affiniteit vr ag
2) Covalent binden v FITC op AL moet vr elk AL opnieuw gebeuren
3) Mindere gevoeligheid
Voordelen:
1) 1 stapmethode
2) 1 incubatiestap
3) Tijdswinst
Indirecte methode:
Primair (konijn), secundair (geit) serum
IgG-fractie v konijnenserum geit inspuiten.
antiserum tegen AL v konijn
antiAL (AAb) / secundaire AL. Primair antiserum opwekken
in konijnen incubeert histologsiche coupe die geschikte
ag bevat met:
1) Primair serum, AL binden specifiek aan ag
2) Secundair serum met AAb-FITC waardoor ag
indirect aangetoond w
Serum= GAR (goat-antirabit-serum) (indien primair AL
een mAb is v muizen secundair Ab ook aangepast w dus
RAM = Rabbit – AntiMouse-serum ipv GAR)
, Voordelen:
1) Ag, AL reactie w x verstoord door covalent gebonden FITC methode gevoeliger
2) Gevoeligheid w verhoogd door 2 stapmethode. Op AL kunnen er verschillende AAb
binden met FITC
3) 1 AAb-FITC bruikbaar is voor ieder soort ag
Fluorescentiemicroscoop:
Nadelen:
1) Donkere ruimte nodig
2) Vermoeiend voor de ogen
3) Preparaten kunnen x lang bewaard w (fading v fluorescentie) fotograferen
4) Beeld blijft niet!, moet je direct gaan opslaan op je pc
Enzymgeconjugeerde methoden
Fluorochroom vervangen door enzym
Laag moleculair gewicht, want enzym moet in
staat zijn om te binden met ag-AL want als
hem te groot is heb je anders teveel sterische
hinder om te kunnen binden.
Enzymen zelf zijn zeer belangrijk!!
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller fleurverroens. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $7.54. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
66579 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now