Summary
Zusammenfassung Biologie
- Course
- Institution
Abitur-Zusammenfassung Biologie Baden-Württemberg Immunologie
[Show more]
Seller
Follow
roesepaulina
Content preview
Biologie – Klausur N°4Genetischer Fingerabdruck
Def.: Eindeutige Identifikation von Individuen anhand individueller DNA
− Ein Genort wird betrachtet und die Wiederholungen bestimmter Basenabfolgen werden gezählt
=> Charakteristisch für jeweilige Individuum
Anwendung: Vaterschaftstest, Forensik, Verwandschaftsanalyse (Evolutionsforschung)
Polymerase-Kettenreaktion [PCR] = Vervielfältigung der DNA/Replikation von DNA-Stücken, ausgehend von einem einzigen Molekül
Ablauf: => wird 20-50-mal wiederholt Bestandteile:
I. Denaturierung: Auf 94 ℃ erhitzen => Wasserstoffbrücken werden getrennt
− Alle 4 Nukleotide der DNA
=> Doppelstrang wird in Einzelstränge zerlegt
− DNA-Polymerase [hitzestabil]
II. Hybridisierung: Bei 50-70 ℃ => Anlagerung des Primers an 3‘-Ende zum Start der
=> Taq-Polymerase [thermus aquaticus]
Synthese
III. Amplifikation: Bei 70 ℃ => Synthese; Nucleotide werden an die Einzelstränge − Primer [kurzes DNA-Stück]
angelagert, durch DNA-Polymerase entsteht der komplementäre Strang => Lässt sich, wenn Nukleotidsequenz der
DNA bekannt ist, chemisch herstellen
Funktioniert nicht? Primer/Polymerase bindet nicht, Denaturierung des Doppelstrangs, ... − DNA-Probe
25
Besonderheit: ausgehend von einem einzigen Molekül; Nach 25 PCR-Zyklen gibt es 2
Kopien
Gelelektrophorese
Analyse von Nucleinsäure- und Proteingemischen => Moleküle werden voneinander getrennt und können sichtbar gemacht werden
− Beruht auf unterschiedlich schnellen Wanderung v. geladenen Molekülen zwischen den Elektroden eines Gleichspannungsfeldes
=> Anionen (negative geladen) laufen zur positiven Anode, Kationen (positiv geladen) laufen zur negativen Kathode
− Gel wird als Trägermaterial verwendet => wirkt wie Netz, behindert die zu trennenden Moleküle bei ihrer Wanderung
=> meisten Agarose- oder Polyacrylamidgele
Vorgehen:
− DNA-Proben werden in Vertiefungen [Taschen] eines Gels gebracht
− DNA hat negativ geladene Phosphatgruppen => DNA-Fragmente wandern von Kathode zur Anode
− Je kürzer Fragmente sind, desto besser können sie durch Maschen des Gels durchdringen – Je länger, desto langsamer kommen sie
voran [Bremswirkung]
− Man lässt einen Farbstoff mitlaufen um Fortschreiten der Gelelektrophorese zu verfolgen
− Gleichlange DNA-Fragmente legen in bestimmter Zeit gleichlange Strecken zurück, haben die gleiche Wanderungsgeschwindigkeit
=> liegen nach der Elektrophorese im Gel in Banden vor
− Sichtbar machen => fluoreszierende Reagenzien wie z.B. Ethidiumbromid werden hinzugegeben => DNA-Banden leuchten bei uv
Strahlung hell auf und werden sichtbar [oder mir radioaktiven Markern sichtbar machen]
Gensonden
− Ziel: Auffinden eines bestimmten Gens im Genom
− Voraussetzung: kleiner Teil der Basensequenz des Gens muss bekannt sein
Vorgehen:
− Kurze einsträngige DNA- oder RNA-Stücke , die komplementär zur Basensequenz sind werden hergestellt
=> lagern sich an das gesuchte Gen an
− Gensonden sind zur Identifizierung radioaktiv oder mit Fluoreszenzfarbstoff markiert
Herstellung von copy-DNA [cDNA] aus mRNA
Ziel: Gewinnung von cDNA, die als Spender-DNA oder Gensonde verwendet werden kann
Vorgehen
cDNA enthält nur Exons
− Reife RNA wird aus Zellen, in welchen gerade das gewünschte Gen abgelesen wird, isoliert
=> Eignet sich gut um eukaryotische
[nur Exons; nach Prozessierung + Transkription]
Gene in Bakterien einzusetzen, da diese
− Reverse Transkriptase ergänzt mRNA zu einem RNA-DNA-Hybrid-Doppelstrang
nicht fähig sind Introns zu entfernen
− Spalten des Hybrid-Stranges durch Denaturierung [z.B. Insulingen Plasmid-Technik]
− DNA-Einzelstrang wird mithilfe der DNA-Polymerase zum Doppelstrang
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller roesepaulina. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $3.23. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
67474 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now