Celcultivatie
Wat
Cellen laten groeien onder gecontroleerde omstandigheden
-> verkregen van meercellige eukaryoten
-> ook menselijke cellen, plantencellen, schimmels, microben
-> eenvoudigste vorm van een celcultuur: groeien van cellen in een artificieel milieu van:
Nutriënten (cultuurmedium)
Groeioppervlak (celcultuur recipiënten)
Ideale condities T, vochtigheid, atmosfeer
Waarom
-> minder dierexperimenten
-> verschil met dier-/orgaanexperimenten:
Laat toe om onder gestandaardiseerde condities te werken
geen systemische, hormonale, neurale of hemodynamische factoren
Laat toe om effecten van geselecteerde mediatoren op celproliferatie, transportactiviteiten,
celadhesie en migratie te bestuderen
Waardevol voor bestuderen IC gebeurtenissen (receptor-ligand interactie)
Toepassingen
1. Screenen/testen van nieuwe therapeutische compounds
-> nieuwe geneesmiddelen moeten verschillende fasen doorlopen voor ze kunnen worden
goedgekeurd en gecommercialiseerd
-> pre-klinische fase: testen op dieren: testen toxiciteit, efficiëntie
-> beschikbaarheid celcultuurmodellen: testen uitvoeren in vitro waardoor het aantal dieren
kan worden gereduceerd + goedkoper
2. Productie van therapeutisch relevante biologische compounds: horonen, eiwitten, AL
-> recombinante DNA techniek
-> complexe geneesmiddelen die niet via chemische synthese kunnen worden geproduceerd
3. Ontwikkelen van vaccins
4. Fundamenteel onderzoek (regeneratieve geneeskunde) en stamcelonderzoek
5. In vitrofertilisatie
Soorten celcultuur
Primaire celcultuur
Geïsoleerd uit weefsels en lichaamsvochten van mens en dier
Vanaf isolatie van cellen tot ze confluentie hebben bereikt
o Confluentie = volledige oppervlak bedekt
Confluentie: cellen worden gesubcultiveerd
Na eerste subcultivatie -> primaire cultuur = cellijn
Cellen delen beperkt tot ze senescent worden eindige cellen
Voordelen Nadelen
-> reflecteren de in vivo functionaliteit dan -> functioneel gedifferentieerde primaire
continue cellijnen culturen: beperkte levensduur
-> behoud normale inverse relatie tussen -> cel-specifieke functies verminderen in tijd
celgroei en differentiatie (kan verbeterd worden door gebruik van ECM,
co-culturen)
1
, -> beperkt reproduceerbaar
-> berperkte beschikbaarheid en ethisch dosier
belangrijk bij gebruik van materiaal
Functionaliteit = afhankelijk van aantal passages, bij te veel passages -> grootste groepcapaciteit gaat
domineren
Permanente cellijnen/ continue cellijnen
Afgeleid van tumoren
Geïmmortaliseerd: via transformatie van primaire cellen door introductie van oncogenen ->
onbeperkte proliferatiecapaciteit
Commercieel verkrijgbaar
Hoge reproduceerbaar
Verlies functionele eigenschappen originele cel
Voorbeeld:
-> Hela cellen: baarmoederhalscellen
-> chinese hamster ovary cells (CHO): normaal aantal chromosomen i.v.m. niet getransformeerde
celtype
-> HepG2: humane levertumor cellijn: sterk gedifferentieerd tot levercel en synthetiseert dus in vitro
specifieke serumeiwitten afkomstig van de lever
-> UMR-106 rat osteosarcoma cellijn: botvormende cellen van de rat
Fibroblasten: afkomstig van stukjes huid
Snelle verdubbelingstijd
GF niet nodig
Produceren ECM, sterke adhesie
Lymfocyten: na scheiding van andere BV door evenwichtsdichtheidcentrifugatie
Endotheelcellen: uit navelstreng
Niercellen: na nefrectomie
Mogelijkheid tot cultivatie van verschillende celtypes
Vasculaire gladde spiercellen:
Media van vaatweefsel
Gebruikt als in vitro model van vasculaire calcificatie
Osteoblasten: van fetale ratcalvaria of stromale beenmergcellen
2
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller AVL2. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $4.88. You're not tied to anything after your purchase.