Summary
Samenvatting Histotechniek review 2e deel van de minor M-DCH
- Course
- Institution
Histotechniek volledig samengevat voor de 2e thema toets van de minor histologie&cytologie
[Show more]
Seller
Follow
kelly-lan
Content preview
Histotechiek review 2H4 fixatie
Soort fixatief
● Ken de relatie tussen fixatie, morfologie en antigeniciteit! (drieluik)
● Fysische fixatie geeft een goede antigeniciteit
● Chemische fixatie geeft een goede morfologie e.g. coagulerende of cross-linkende
fixatieven
● Een chemische fixatie maakt bindingen met het weefsel waardoor de antigenecitiet
lager wordt → omdat er minder antilichamen kunnen binden aan het weefsel sinds
deze dan al bezet zijn
Antilichamen
● Antilichamen herkennen altijd de epitope, daarom wil je graag een hoge
antigeniciteit
● Maximale en optimale antigeniciteit (fysisch) en morfologie (paraffine) willen we
krijgen
● Met magnetron en hitte kunnen de epitopen op een weefsel weer herkenbaar worden
gemaakt → antigen retrieval
● Aceton is heel mild, hoe lager de temperatuur, hoe milder het fixatief wordt om alle
eiwitten tot stand te houden
Fysische fixaties
● Gebruik van hitte en kou e.g. vloeibare CO2, magnetron etc.
● De magnetron word vooral gebruikt om de epitope bereikbaar te maken
● Patos versnelt de fixatie proces doordat moleculen hierdoor sneller bewegen
● Vries-substitutie is onder vacuüm de water mantel verwijderen in e.g. aceton/alcohol
→ dit voorkomt krimping!
● Elke oplossing heeft een kritisch punt, dit is waar een vloeistof naar de gasfase
springt
Chemische fixaties
● Tegenhangers van de fysische fixatieven
● Formaldehyde fixatieven zijn reversible, maar glutaaraldehyde fixatieven juist niet
● Met osmium en glutaaraldehyde heb je maximale fixatie en morfologie voor de
elektronenmicroscopie!
, Buffers
● Er zijn veel verschillende buffers
● Fosfaat buffer pH 7.4
● Osmolariteit = het aantal deeltjes in een buffer → dus als deze te laag is krijg je
hypotoom (lage osmose waarde), terwijl je een isotome oplossing (gelijk) wilt hebben
● De osmolariteit kan e.g. worden getest met bloed, hier zie je dan dat de bloedcellen
knappen of krimpen als er geen isotome oplossing is
● Om de osmolariteit te verhogen kun je sucrose (suiker) toevoegen om het aantal
deeltjes te verhogen
Hypertome oplossingen
● Deze resulteren in de beste morfologie (400-450 mOsm)
● Krimpen kan worden voorkomen door high-pressure freezing of door een additief toe
te voegen e.g. Bouin
● Tabel 4.2 (overzicht van kleuringen en fixatieven)
**4% formaldehyde = 10% formaline
Normaliteit
● Normaliteit gaat altijd om de H+ (lading)
● Molariteit gaat altijd om gewicht
● Elk weefsel heeft zijn eigen osmolariteit maar wordt alsnog formaline
● Spieren worden altijd opgezet omdat deze anders krimpen onder fixatie!
Alcoholen
● Alchoholen dehydreren, maar kunnen gebruikt worden als fixatieven
Appendix 1 traditionele methodes
Lipiden
● Om lipiden aan te tonen gebruik je fysische fixaties om alle vetten te behouden
● Vet kleuringen lossen op in het vet e.g. Sudan, Oil-red O (specifiek voor vetten)
● Vetten liggen verspreid over het hele lichaam
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller kelly-lan. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $6.95. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
53068 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now