Summary
Moleculaire diagnostiek samenvatting M-DCH
- Course
- Institution
Complete samenvatting van moleculaire diagnostiek voor de minor histologie&cytologie
[Show more]
Seller
Follow
kelly-lan
Content preview
Moleculaire diagnostiek**Snap de principe van een techniek voor de toets en hoe je die kan inzetten**
Les 1
- Moleculaire diagnostiek gaat over analyse van DNA/RNA moleculen. Naast
moleculaire diagnostiek zijn er ook nog andere diagnostieken.
- Directe en indirecte diagnostiek
→ Direct: direct naar het pathogeen of gen op zoek en aantonen
→ Indirect: kijken naar een reactie (ontsteking) die plaats heeft gevonden, zijn er
bepaalde antilichamen aanwezig?
Wij kijken naar directe diagnostiek
Belangrijk voor een diagnostische test:
1. Een test moet specifiek zijn voor wat je wil aantonen
2. Snelheid
3. Gevoeligheid
4. Betrouwbaarheid → interne controles zijn belangrijk, deze doorlopen het hele
proces van isolatie tot amplificatie om foute-negatieve te voorkomen
5. Kosten
DNA en RNA technieken:
- DNA isolatie
- PCR, sequencing
- Als je RNA zoekt, moet je reverse transcriptase doen om er dubbelstrengs DNA van te
maken voordat je begint met een techniek
- DNA en RNA kan geisoleerd worden uit histologische coupes, formaline preserveerd het
weefsel en cross-linken met eiwitten
- Om specifieke cellen te isoleren kan er gebruik gemaakt worden van laser
microdissectie
, Stap 1: sample komt binnen op het lab, kan biopt zijn, vloeibaar bloed, cytologische
punctie, kweek, infectie enz. het sample moet vloeibaar zijn/gemaakt worden.
- Het biopt moet fijngemalen worden zodat de cellen gelyseerd zijn. Dan binden
aan beads en dan wassen van de beads om viezigheden te verwijderen en
elueren zodat het eraf gehaald kan worden.
- Met magneet magnetic beads vasthouden en wassen. Dan elutiebuffer en dan
heb je je gezuiverde nucleïnezuren.
Verschillende stations om je samples in te doen:
- Zo’n apparaat is alleen efficiënt als je ook veel samples hebt. Niet voor 1 of 2
samples per dag, dan kun je het beter met de hand doen. Maar in het ziekenhuis
is het opgeschaald en komen veel samples waardoor het automatisch gebeurd..
Stap 2: Volgende stap is analyse
- Spectrofotometer: zuiverheid
- Gel elektroforese: grootte
- PCR, sequencing: volgorde
→ Hoe weet ik nou dat het niet mis is gegaan. Hoe weet je zeker dat de uitkomst
negatief is en niet dat de isolatie mislukt is?
- Je kan elke negatief opnieuw doen, maar toch weet je het dan niet zeker.
- Je moet een controle inbouwen. Interne ingebouwde controle. Je voegt een
beetje DNA toe van wat niet te maken heeft met je sample in een bekende
hoeveelheid. Als je je interne controle DNA kan terugvinden en je sample is
negatief, dan weet je dat de isolatie goed is gegaan.
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller kelly-lan. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $7.07. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
64438 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now