Samenvatting van hoofdstuk 22 uit Concepts of Genetics voor het vak genetica uit het 1e jaar LST en Biologie aan de RUG. Samenvatting over collegestof en leerstof uit het boek.
Recombinant DNA technology
Concepts of Genetics – Hoofdstuk 22
22.1
Recombinant DNA techniek kan plaatsvinden door restrictie enzymen en DNA
cloning vectors.
Restrictie enzymen zijn een bescherm mechanisme van bacteriën tegen infecties
door virussen. Binnenkomend viraal DNA wordt in stukjes geknipt, zodat het geen
schade aan de bacterie kan veroorzaken.
Restrictie site plaats waar restrictie enzymen gaan knippen. Dit is een plek op
het DNA met een specifieke nucleotiden sequentie.
Palindroom de nucleotide sequentie is hetzelfde op beide strengen van het
DNA als je in de 5’ naar 3’ richting leest. 5’ AAGCTT 3’ boven en onder 5’ AAGCTT
3’
Blunt ends zijn recht naar benden geknipt en hebben geen uitsteeksel. Deze
passen altijd op elkaar.
Cohesive ends hebben wel uitsteeksels en kunnen makkelijker geligeerd worden.
Stukjes DNA die door hetzelfde restrictie enzym zijn geknipt, kunnen aan elkaar
gaan zitten. DNA ligase herstelt de backbone.
Plasmide wordt ook wel vector genoemd stuk DNA dat iets op kan nemen en
naar een andere cel kan brengen.
- Een vector heeft meerdere restrictie sites, zodat er DNA fragmenten
kunnen worden ingevoegd die moeten worden gekloond.
- Vectoren moeten in gastheercellen worden ingebracht om onafhankelijke
replicatie van het vector DNA en elk DNA fragment dat het draagt te
krijgen.
- Vectoren moeten een selectable marker gene hebben (meestal een
antibiotica resistentie gen), zodat je onderscheid kunt maken tussen
gastheercellen die het DNA wel hebben opgenomen en gastheercellen die
dit niet hebben gedaan.
- Veel vectoren hebben specifieke sequenties zodat sequencing van het
nieuwe DNA mogelijk is.
- De vector en het ingebrachte DNA fragment moeten makkelijk te isoleren
zijn uit de gastheercel, zodat het gekloonde DNA elders gebruikt kan
worden.
Een plasmide is een extrachromosomaal dubbelstrengs DNA molecuul dat
onafhankelijk van chromosomen kan repliceren in bacteriële cellen.
Transformatie het overbrengen van plasmiden in bacteriën. Vaak worden er
maar één of een paar plasmiden overgebracht in een bacterie door middel van
transformatie.
Multiple cloning site plaats waar veel restrictie sites aanwezig zijn voor de
verschillende restrictie enzymen.
Aan de kleur van je kolonies kan je zien of er mogelijk recombinatie is
opgetreden.
Knippen met twee verschillende restrictie enzymen zorgt ervoor dat er geen
zelfsluiting plaats kan vinden.
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller laura33. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $3.21. You're not tied to anything after your purchase.