Summary
Samenvatting instrumentele chemie (deel 3 chromatografie)
- Course
- Institution
samenvatting slides + schema's
[Show more]
Seller
Follow
iamMLTer
Reviews received
Content preview
ChromatografieAlgemene inleiding
= Scheiding van mengsels in de verschillende componenten eventueel gevolgd
door kwalitatieve (identificatie) en/of kwantitatieve analyse.
2 fasen:
- Stationaire fase (SF): Vaste stof of vloeistof die vastzit in de kolom, plaat
of papier.
- Mobiele fase (MF): Gas of vloeistof die zich over de stationaire fase beweegt.
Componenten in mengsel: Verschillende affiniteit voor beide fasen
MF
Eluent
+ staal
SF Elutie A Best oplosbaar in/grootste affiniteit voor stationaire fase
→ Langst in kolom
B Best oplosbaar in/grootste affiniteit voor mobiele fase
→ Migreert snelst
Eluaat
Affiniteit voor een fase → Uitgedrukt als verdelingsevenwicht of
partitiecoëfficiënt
Voorwaarde voor scheiding: Componenten hebben een verschillend
verdelingsevenwicht
[𝐴]𝑠𝑓 [𝐵]𝑠𝑓
𝐾𝑎 = ≠ 𝐾𝑏 =
[𝐴]𝑚𝑓 [𝐵]𝑚𝑓
- Dynamisch
- Organische componenten: verschillende snelheid
Eigenschappen moleculen
Snelheid mobiele fase
Selectieve vertraging → Scheiding
Indeling naar aard mobiele fase:
- Vloeistofchromatografie (LC):
o Mobiele fase → Vloeistof
o Stationaire fase → Vloeistof (LLC)
→ Vaste stof (LSC: HPLC)
- Gaschromatografie (GC):
o Mobiele fase → Gas
o Stationaire fase → Vloeistof (GLC)
→ Vast (GSC)
+ Sneller
+ Scheiden van complexe mengsels
− Vluchtige stoffen: Staal moet om te zetten zijn naar gasfase
, Staalvoorbereiding
EXTRACTIE
- Isoleren doelwitcomponenten
- Concentreren
- Verwijderen interfererende componenten :
o Eiwitten → Enzymen, denaturatie
o Vetten → Lipasen
o Conjugaten → Verhitten bij lage pH, enzymen
Vloeistof – vloeistof extractie
Polariteit:
- Likes likes like
- Extractiebuisje of – trechter
Vaste fase extractie
= Voorbereiding: Opzuiveren bepaalde analieten uit een mengsel om deze erna
met een andere methode te analyseren
Analoog aan principes chromatografie:
o Selectieve verdeling over SF en MF
o Normal – en reversed phase
o Ionenuitwisselingschromatografie
Stappen:
1. Selectie kolom: Specifiek om bepaalde componenten af te zonderen
2. Conditionering kolom: MF laten doorlopen en kolom vochtig maken
3. Lading staal: Deels blijven hangen en deels doorlopen
4. Wasstap: Alles wat niet gebonden is verwijderen
5. Elutiestap: Alles wat wel gebonden is losmaken
6. Droogdampen: Concentratie verhogen
7. Eventueel derivatisatie: Chemische modificatie om stoffen bruikbaar te maken
voor verdere analyse
Toepassingen:
- Klinische chemie
- Minikolommen voor zuiveren DNA, RNA, GM
Standaardisatie
Voor kwantitatieve bepalingen: Standaard met gekende concentratie
Interne standaard → Meest accuraat
- Verschillend van analiet → Homoloog (fluctuatie opvangen)
Identieke fysische/chemische eigenschappen als analyt: detecteerbaar
- Toegevoegd aan staal = spiken
- Signaal interne standaard vergelijken met signaal staal
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller iamMLTer. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $3.23. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
67096 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now