Summary
VOLLEDIGE samenvatting celcultuur en ELISA
- Course
- Institution
VOLLEDIGE samenvatting celcultuur en ELISA gegeven door prof. Paul Cos
[Show more]
Seller
Follow
biomed124
Content preview
celcultuur en immunochemieH1: inleiding
begin: kikker weefsel dat men ging isoleren en proberen levend te houden
↪ waarom kikker: we kunnen het op kamertemperatuur levend houden, geen
incubator
MAAR problemen als we naar aparte cellen willen gaan
enkele vereisten:
↪ 3 belangrijke ontdekkingen
1) ontdekking antibiotica
2) trypsine -> om cellen los te maken van cultuurflessen
3) ontwikkeling van chemisch gedefinieerde cultuurmedia
- hoe steriel houden? → antibioticum
eerste antibioticum = penicilline
- hoe kunnen we de cellen wel apart krijgen → trypsine toevoegen (een
enzym/protease) → maakt cellen los
- ook cultuurmedia nodig voor aanvoer voedingsstoffen: water + extra stoffen (glucose,
vitamines, …)
polio virus:
= kinderverlamming
= naakt virus = RNA virus
↪ groot probleem in de jaren 40-50
↪ grote doorbraak in de jaren 50 -> eerste keer het poliovirus gekweekt in
celcultuur
virussen = 30-300 nm
↪ eiwitmantel waar genetisch materiaal in zit (RNA virus)
bezit spikes -> glycoproteïne antenne die nodig is om te binden met de receptor v/d cel
↪ hoe maken we het vaccin?
- optie 1: alle virussen worden gecollecteerd en inactief gemaakt
=> dmv formaldehyde -> zorgt voor behoud van structuur maar dood organisme
(hierdoor kan het immuunsysteem goed functioneren)
=> combinatie van een aminozuur en formaldehyde -> enzymen kunnen niet
functioneren → geïnactiveerd vaccin
1
, - optie 2: levend verzwakt vaccin
↪ vermenigvuldiging om het zwakker te maken
↪ zorgen dat enkel het virus kan groeien in celcultuur en niet in lichaam
we hebben veel virus nodig om een vaccin te kunnen ontwikkelen
virus: obligaat intracellulair -> heeft een cel nodig om aan te tasten
HELA cells -> kankeronderzoek
= cellen van de baarmoederhals
nadeel = hela cellen zijn wijd verspreid en besmetten soms ook andere cellen
hybridoma-technologie:
hoe kunnen we antilichamen produceren?
=> B-cellen maken antilichamen aan
B-cellen zullen afsterven als we ze proberen te retrieven, hiervoor hebben we een oplossing
nodig
↪ in de muis spuiten we een antigen en dan gaan we de B-cellen kunnen isoleren
gevolg: B-cellen die een antilichaam aanvallen
probleem: heeft een eindige levensduur
→ smelten samen tot een tumorcel = blijvend groeiend
sommige B-cellen zullen ook “foute” antilichamen aanmaken die niet zullen passen
hybridomas: B-cellen die geen eindige levensduur hebben
↪ polyethyleenglycol toevoegen aan B-cellen om een tumorcel beter te fusioneren
volgende stap
→ antigeen coaten waardoor we enkel de goede hybridomas overhouden (alle plasmacellen
bij elkaar gooien in een antigen)
2
, samengevat
1) Antigeen wordt ingespoten → muis begint antilichamen te produceren
2) Milt wordt weggenomen B-cellen (= cellen die antilichamen aanmaken)
worden geïsoleerd
3) Aanmaak hybride cel = hybridoma door tumorcel en B-cel te laten fuseren
Hybridoma = B-cellen die eeuwig (nodige) antilichamen kunnen produceren
Polyethyleenglycol wordt toegevoegd aan B-cellen en tumorcel om beter te fusioneren
4) Antigen coaten alle plasmacellen samen gooien bij antigen en enkel goede hybridomas
selecteren (=Hybridomas gescreend en gewenste antilichaam geselecteerd, de anderen
worden weggewassen)
5) Antilichaam-producerende hybridoma worden gekloond
6) Gekloonde cellen worden verwijderd, enkel nodige antilichamen blijven over
cel en weefseltechnologie:
DOEL: Het verkrijgen van (bio)implantaten om uitgevallen of slecht werkende organen en
weefsels te ondersteunen of te vervangen
Vooral amputaties bij diabetes
=> slechte doorbloeding zorgt voor slechte genezing van wonden
Diabetes type I: eilandjes van langerhans functioneren niet of slecht
- oplossing: scaffold: blauwe gel: plaatsen die ervoor gaat zorgen dat ze wel op actief
worden gezet
hoe gaan we aparte delen in celcultuur brengen? ->
1) weefsel kapot maken
2) nu verkrijgen we allemaal aparte cellen die in een cultuurfles worden gebracht
3) stukje plastic; substraat waar cellen op zullen vasthechten
4) uitspreiden en groeien tot een monoloog, na ong een week -> afsterven
=> oplossing trypsine = zorgt ervoor dat cellen niet afsterven
5) subcultivatie of passage = cellen in een nieuwe cultuurfles brengen
voordelen
- controle van de omgeving
fysico chemische parameters:
● pH (7.2), temp (37°C), osmotische druk (isotoon -> 0,9% NaCl), O2 (21%) en
CO2 (0,03%)
fysiologische parameters:
● voedingsstoffen ( +% serum)
-> meeste cellen hebben echter een supplement nodig in hun media om te kunnen
delen
3
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller biomed124. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $9.70. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
67096 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now