Samenvatting practica microbiologie - leerstof voor practicumtoets! 3e Ba DGK UA
110 views 7 purchases
Course
Microbiologie (1069FBDDIE)
Institution
Universiteit Antwerpen (UA)
Samenvatting practica microbiologie - leerstof voor practicumtoets! 3e Ba DGK UA: alles te kennen voor practicumtoets op einde practica microbiologie + examenleerstof!
BACTERIOLOGIE
BASISTECHNIEKEN
Transfer van micro-organismen
Algemeen
Aantal cellen = inoculum overgebracht (inoculeren)
Aseptische wijze
Vast of visceus materiaal mbv entlus/entoog
Fungi: entnaald
Entnaalden na inoculeren geflambeerd tot gloeiend rood (2 seconden, niet langer)
Flamberen: verticaal in vlam houden
Vloeibaar bacteriemateriaal: pasteurpipetten, indien aantal druppels overenten
Beënten van een agarplaat: methode van de vijfhoek
Telkens 6 evenwijdige lijnen uitstrijken
Laatste zijde van de vijfhoek lijnen zigzag uitstrijken tot in midden agar
Laatste zone geen contact met eerste zone
Beënten van agarplaat: homogeen
Kiemen centripetaal let een entoog zigzag verspreiden over vaste
voedingsbodem
Druppel homogeen uitspreiden met gebogen pasteurpipet
Pipetteren
Wanneer volume niet van belang is: entoog om bacteriesuspensie op agar over te brengen
Wanneer volume van belang is: pasteurpipet, gegradueerde pipet of micropipet
Pasteurpipet: geen markeringen (druppels)
Gegradueerde pipet: verdunningsreeksen maken + bolpeer of pipet aid
Micropipet + wegwerptip: voor kleine volumes
Concentratiebepaling via plaattelling
Plaattelling en membraanfiltratie
Kiemgetal suspensie = bacteriële concentratie van deze suspensie
Plaattelling = Viable Plate Count Method = CFU – telling
CFU = colony forming unit = aantal levende kiemen, indien elke kolonie afkomstig is van 1
levende kiem – rekening houdend met verdunning
Sommige M-O groeien in aggregaten: cellen groeperen waardoor 1 kolonie afkomstig kan zijn
van verschillende levende cellen
o Streptococcen zullen vaak als diplococ voorkomen, waarbij dus 2 bacteriën
samenhangen
o onderschatting van aantal levende kiemen
CFU-waarde is betrouwbaar wanneer tussen 20 – 200 CFU’s op volledige agarplaat
o Tussen 10 – 100 CFU’s op halve agarplaat
o < 20 CFU’s onbetrouwbaar: statistische fout te groot
o > 200 CFU’s onbetrouwbaar: kolonies vloeien in elkaar
, Staal hoge CFU-waarde verwacht: verdunningsreeks
Staal lage CFU-waarde verwacht: opconcentreren door membraanfiltratie
o Filter met poriegrootte 0,22 micrometer; alle bacteriën blijven achter op filter
o Filter toegevoegd aan groeimedium kolonies laten groeien
Turbiditeit
Sneller, minder nauwkeurig
Optische densiteit = turbiditeit
Kiemen in vloeibaar medium groeien = medium troebel maken
Spectrofotometer concentratie bepalen
Oud bacterieel staal is ook troebel ! geen onderscheid tussen levende en dode kiemen
Telkamer
Microscopie
Telkamer met gekend volume bacteriële suspensie
Kan enkel wanneer bacteriën relatief stil liggen bacteriën met flagel
In real time bekijken: je ziet het aantal bacteriën + onderscheid maken tussen levende en
dode kiemen
Kleurstof tripaanblauw: levende bacteriën zullen kleurstof actief uit hun cytosol pompen =
ongekleurd. Dode bacteriën kunnen dit niet meer = blauw aangekleurd
INHIBITIE VAN MICROBIËLE GROEI
Antibiotica
= stoffen, ofwel door micro-organismen ofwel semi-synthetisch geproduceerd
Begrippen
Breed-spectrummiddelen: zowel G+ als G-
Smal-spectrummiddelen: tegen G+ of G-
Bacteriostatisch: bacteriegroeiremmend
Bactericide: bacteriedodend
MIC = minimum inhiberende concentratie: laagste concentratie van AB stof die
groeiremmend werkt
MBC = minimum bactericide concentratie: laagste concentratie van AB stof die
bacteriedodend werkt
Effecten van AB op bacteriecultuur in vitro
Na bepaalde inwerktijd worden de bacteriën geremd of gedood
Sommige bacteriën kunnen ontsnappen aan de invloed van het AB en zullen persisteren;
deze persisterende bacteriën kunnen dan weer uitgroeien (grafiekjes)
Belangrijkste bactericide AB: penicilinen, cefalosporinen, aminoglycosiden en fluoroquinolonen
Interacties
Synergisme: middelen versterken elkaars werking (som effecten groter dan apart)
Antagonisme: middelen verminderen elkaars werking
Indifferentie: middelen beïnvloeden elkaars werking niet
Disk diffusie / Kirby-Bauer test
Antibacteriële activiteit van een AB
KWALITATIEF
M-O in contact met AB, geïmpregneerd op een papierschijfje
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller decuypermarie. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $6.14. You're not tied to anything after your purchase.
