Summary
Samenvatting Methoden in het biomedisch onderzoek Hoofdstuk 12 Celbiologische methoden
- Course
- Institution
Samenvatting hoofdstuk 12 Celbiologische methoden
[Show more]
Seller
Follow
elienbloemen
Reviews received
Content preview
Methoden in biomedisch onderzoekHoofdstuk 12: celbiologische methoden
Flow cytometrie
Principe zoals FACS, maar geen scheiding van cellen analyse van merkers
o Doel: bepalen hoeveel % merker de cellen bevatten
Eiwitten van interesse (merkers) worden aangekleurd met fluorescent gelabeld
antilichaam
Intra-cellulaire merkers en/of cel oppervlakte merkers
1 of meerdere merkers worden tegelijk geanalyzeerd (afhankelijk van aantal lasers
en kanalen)
Resultaten worden geplot in histogram of scatter plot voor enkele duizenden cellen
Celproliferatie
BrdU test
o Doel: celproliferatie meten
o Principe: Bromodeoxyuridine (thymidine uit S-fase) toevoegen aan cellen en laten
permeabiliseren, dan een gemerkt anti BrdU antilichaam toevoegen meten
Celleefbaarheid
MTT test
o Doel: aantal levende cellen meten
o Principe: MTT is geel en oplosbaar dat door mitochondriën (dehydrogenase) word omgezet
naat paars onoplosbaar formazan kleuring evenredig met aantal cellen meten door
optische densiteit/absorbantie
Celdood
Tunel test
o Doel: meten van apoptose
o Principe: apoptose gaat gepaard met DNA fragmentatie, kan gedetecteerd worden via
inbouw van Bromo-dUTP (Br-dUTP) in DNA door Terminaal deoxynucleotidyl Transferase
(TdT) detective met fluorescentie of kleuring
Propidium Iodide(PI) flow cytometrie
o Doel: dode cellen tellen
o Principe: PI kan enkel dode cellen binnendringen en word fluorescent na intercalatie met
DNA
Annexine V/Propidium Iodide flow cytometrie
o Doel: levende, vroeg apoptotische en dode cellen onderscheiden en tellen
o Principe: PI kan alleen dode cellen binnendringen, intercaleert met DNA en wordt
fluorescent. Bij start apoptose flipt fosfatidylserine van de cytoplasmatische zijde van de cel
membraan naar de buitenzijde, zodat gelabeld annexine V kan binden aan fosfatidylserine.
Celcyclus
PI flow cytometrie op gepermeabiliseerde cellen
o Doel: cellen in verschillende fasen onderscheiden en tellen
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller elienbloemen. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $3.75. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
72042 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now