Summary
Samenvatting Methoden in het biomedisch onderzoek 1 Hoofdstuk 9 Spectroscopie
- Course
- Institution
Samenvatting hoofdstuk 9 spectroscopie
[Show more]
1 review
By: mohamedourimchi13 • 1 year ago
Seller
Follow
elienbloemen
Reviews received
Content preview
Methoden in biomedisch onderzoekHoofdstuk 9: spectroscopie
Spectroscopische technieken: inleiding
Spectroscopie= materie bestuderen op basis van interactie met elektromagnetische straling
o Kwalitatieve analyse: kijken welke stoffen aanwezig zijn en eventuele onzuiverheden
o Kwantitatieve analyse: hoeveel is er aanwezig, de concentratie en hoe zuiver de staal is
o Volledig spectrum van licht kan gebruikt worden, verschillende energieniveaus laten toe om
verschillende eigenschappen te onderzoeken
Elektromagnetische straling: golf <-> deeltje
o Bundel van deeltjes (fotonen) met specifieke energie worden verstrooid of gedetecteerd
o Fotonenergie: E = hν = hc/λ = hc ν
o h = constante van Plank (6.63 x 10-34 J.S)
ν = frequentie, λ = golflengte, ν = golfgetal = 1 / λ
Absorptie: attentuatie van de invallende straling door het staal
o Vermindering van de intensiteit
o Komt in meeste spectroscopische technieken voor
Emissie: excitatie door invallende straling, veroorzaakt emissie van straling
o In alle richtingen
o Andere uitgaande golflengte dan golflengte van invallende straling
Interactie met materie
o Absorptie: de stof gaat van lage energie naar een hogere energie toestand (aangeslagen
toestand)
o Enkel fotonen met een energie die precies overeenkomt met het energie verschil tussen 2
niveaus worden geabsorbeerd
o Transities mogelijk tussen energieniveaus
Spectrum= intensiteit/absorptie als functie van energie
o Verschillende stoffen hebben verschillende energieniveaus dus straling zal met een specifieke
energie en dus verschillende manier worden geabsorbeerd
, UV/Vis spectroscopie
Spectrofotometrie: spectroscopie met ultraviolet/zichtbaar licht
o Voornamelijk op basis van energietransities van elektronen
o Kwalitatieve en kwantitatieve analyse mogelijk
Opmeten verminderde lichtintensiteit bij verschillende frequenties als de lichtbundel doorheen het
staal gaat
o Lichtbron: juiste bereik van golflengtes (200-800nm), moet voldoende intens zijn
Halogeen of deuterium lamp zorgt voor een continu spectrum van 160-280nm, is
gebaseerd op elektrische excitatie
Wolfraam lamp (gloeilamp) zorgt voor zichtbaar en infrarood spectrum (350-
2200nm) en is gebaseerd op de verwarming van een filament dat gaat gloeien
bereik van golflengtes wordt bepaald door de temperatuur
Xenon lamp zorgt voor zichtbaar en ultra violet spectrum (250-600nm) en is
gebaseerd op elektrische stroom doorheen xenon dat een thermische excitatie
veroorzaakt met zeer intens licht
o Selectie golflengte
Absorptiefilter: een glas met metaaloxides absorberen ongewenste golflengte
waardoor een deel van de lichtintensitiet verlopen gaat (goedkoop)
Prisma/monochromator: werkt op basis van lichtbreking en scheidt de verschillende
frequenties van polychromatisch licht zodat een bepaalde golflente kan worden
gekozen en gebruikt
Reflectierooster/grating: monochromator op basis van interferentie en het feit dat
licht verschillende afstanden aflegt bij reflectie in verschillende invalshoeken
Sleufopening nodig bij het gebruik van een monochromator en de
stalenhouders/cuvetten moeten transparant zijn en een vaste geometrie
hebben
Lichtdetectie: conversie van fotonen naar stabiel elektrisch signaal
o Fotobuis: elektronen worden vrijgegeven door absorptie van een foton door lichtgevoelig
materiaal dat dient als kathode, het spanningsverschil zorgt dat elektronen worden
aangetrokken door de anode en er wordt een puls gegenereerd
Voordeel het gevoelig signaal word versterkt, nadeel er is een achtergrondsignaal
door de thermische elektronen
o PMT/ Photo-multiplier-tube (uitbreiding van fotobuis): het foton botst op een geladen
metaalplaat waardoor er elektronen los komen, elk dynode is minder negatief dan de vorige
en trekt dus de elektronen aan. Elk invallend elektron maakt andere elektronen los, gebruik
van meerdere dynodes versterkt het signaal
Voordeel het is zeer gevoelig voor lage lichtintensiteit en geeft snelle respons,
nadeel het vereist hoogspanning en intens licht kan schade veroorzaken
o Opstelling: single beam vs dual beam
Single beam: goedkoop maar de gevoeligheid van toestel kan gaan variëren hierdoor
kan je voor eenzelfde staal verschillende waardes krijgen
Dual beam: meet gelijktijdig een blanco zodat het meetresultaat continu
gecorrigeerd word op drift en ruis, dit is duurder
Wat kan je meten met spectrofotometrie
o (niet) geconjugeerde systemen: hoe meer geconjugeerd een systeem, hoe minder energie er
nodig is om elektronen van orbitaal te wisselen en dus hoe hoger de geabsorbeerde
golflengte
o Identificatie van specifieke stoffen: bepaalde aromatische basen of aminozuren absorberen
specifieke golflengtes
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller elienbloemen. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $6.48. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
67096 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now