Histologie= weefselleer
-wat is de opbouw van een weefsel (gezien door de microscoop)
-de cellen liggen in weefselverband
Weefsel moet worden bewerkt
Stappen van weefselbewerking
1. Uitprepareren of afnemen van het weefsel
2. De fixatie en het doorvoeren van het weefsel
3. Het inbedden van weefsel
4. Het trimmen en snijden van de weefselblokjes en het opplakken van coupes
5. Het kleuren en insluiten van coupes en technische controle
Fixeren van het weefsel
Chemische vs. fysische fixatie
Hoofdgroepen chemische fixatieven
-coagulerende fixatieven (ethanol): door onttrekken van water worden structuren op hun
plaats vastgelegd
-niet-coagulerende fixatieven (formaldehyde): door crosslinks worden structuren op hun
plaats met elkaar verbonden
Doorvoeren (dehydratie)
Na fixatie:
-water wordt uit weefsel gehaald d.m.v. oplopende ethanolreeks
-weefsels moeten ingebed worden in paraffine: dit is niet mengbaar met ethanol
-ethanol wordt vervangen door intermediaire vloeistof (ultra clear) die zowel met paraffine
als met ethanol mengbaar is
Inbedden van weefsels
Weefselstukjes “doordrenkt” met
paraffine
Sommige weefsels hebben een
richting/oriëntatie
Gericht inbedden:
Opplakken van het weefsel
, M.b.v. gelatine / eiwitglycerine-oplossing
Cytologische kleuring
Cytologie = celleer
-hoe zien de cellen er uit onder de microscoop?
-de cellen liggen los (niet in weefselverband)
PAP (Papanicolaou) kleuring
-klinisch diagnostische kleuring
DAPI kleuring
-kennismaken met fluorescentiemicroscopie
PAP (Papanicolaou) kleuring: bestaat uit 3 kleurstoffen
-PAP I (hemateïne)
-PAP II (orange G)
-PAP III (eosine & azuur)
PAP I: hemateïne
-Basische kleurstof
-Kleurt zure componenten van de cel (DNA)
-Kleuring uitgevoerd bij lage pH → hierdoor wordt het DNA van de
kern selectief gekleurd
-Kernkleuring: donkerpaars/-blauw
PAP II: orange G
-Zure kleurstof
-Moleculair zeer kleine kleurstof: kan in dichte structuren
doordringen
-Kleurt basische elementen in de cel (NH2-groepen van eiwitten)
-Keratine bevattend cytoplasma kleurt oranje
(niet in wangepitheel, maar bijv. wel in huid
PAP III: eosine & azuur
, -Zure kleurstoffen
-Kleuren basische elementen in de cel (cytoplasma)
-Concurrerende kleurstoffen: azuur kleurt metabool actieve cellen, eosine kleurt meer
‘uitgerijpte/gedifferentieerde’ cellen
-Oppervlakkige epitheelcellen: roze (eosine)
-Dieper gelegen epitheelcellen: blauw/groen (azuur)
Fluorescentie kleuring
DAPI: 4’,6-diamidino-2-fenylindool
Fluorofoor: stof die licht met een bepaalde golflengte kan opnemen en met een
andere golflengte (kleur) weer afgeeft
Bindt aan dubbelstrengs DNA
Hematoxyline eosine kleuring
Dé standaard overzichtskleuring voor weefsels
Bestaat uit 2 kleurstoffen
-Hemateïne (donkerpaars/-blauw)
-Eosine (roze)
Praktijk: technische (kwaliteits)controle
-Alle cel onderdelen de juiste (verwachte) kleur?
-Geen ribbels/vouwingen, geen luchtbellen?
Histologische kleuring van de huid
Histologie ↔ pathologie
-Gezond vs. afwijkend (weefselopbouw is verstoord)
HE gekleurde coupe van de huid
-Duidelijk overzicht van de (gezonde) laagopbouw van dit epitheelweefsel
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller admiradc. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $6.31. You're not tied to anything after your purchase.