Summary
Samenvatting Histologie
- Course
- Institution
Samenvatting colleges Histologie
[Show more]
Seller
Follow
roosbrink
Content preview
HistologieHoorcollege 1: Technieken
Histologie: Structuur van cellen en hoe ze zijn gerangschikt. Dit heeft te maken met de
functie van de organen.
Er zijn in het lichaam 4 types weefsel te onderscheiden.
• Epitheelweefsel
• Bindweefsel (bot en kraakbeen)
• Spierweefsel
• Zenuwweefsel
Histologie: cel tot functie
Lichtmicroscoop is de belangrijkste tool in de histologie.
Onderdelen om te kennen:
• Oculair
Meestal 10x vergroot
• Objectief
4x tot 40x vergroot
• Preparaat
Stukje weefsel met kleuring
• Condensor
Regelen van de grootte van
het gaatje waar het licht
door heen gaat.
• Diafragma
Regelen van de sterkte van
het licht
,Weefsel inbedden en snijden
1. Het weefsel wordt in kleine stukjes gesneden.
2. Fixatie: Het weefsel wordt in formaldehyde gelegd. Dit moet een gebufferde
oplossing zijn zodat de pH niet te zuur wordt. Er ontstaan cross links in de
molecuulstructuur van de eiwitten. Daardoor worden enzymen inactief waardoor het
weefsel niet meer wordt afgebroken.
3. Dehydratie: Tijdens de dehydratie wordt al het water uit het weefsel gehaald. Dit
gebeurt door het weefsel in hoger oplopende concentraties alcohol (EtOH) te leggen.
4. Clearing: De alcohol wordt weggehaald en het weefsel wordt in organische
oplosmiddel gelegd. Het organische oplosmiddel kan mixen met paraffine, waar het
weefsel uiteindelijk in wordt gelegd.
5. Infiltratie: Het weefsel komt in een bad van paraffine met een temperatuur van 52-
60 graden, omdat paraffine bij deze temperatuur vloeibaar is. Dit blijft staan zodat de
paraffine diep het weefsel binnendringt.
6. Embedding: Paraffine wordt afgekoeld, zodat het vast wordt. Het weefsel is nu
ingebed in paraffine.
7. Snijden: Na het afkoelen wordt het weefsel op maat gesneden. Dit wordt gedaan met
een sledemicrotoom. De blokjes worden dan 3-10 micrometer dun.
Voor welk soort weefsels kan EtOH dehydratie voor een afwijkend beeld van het weefsel
zorgen? - Vetweefsel, dit lost op in ethanol. Ventrikels en holtes omdat het water eruit
wordt gehaald.
2 Soortenfixatie: Immersiefixatie en perfusiefixatie
o Perfusiefixatie: Naald gaat in het hart en direct in de aorta.
Eerst pomp je een buffer door het bloedvatenstelsel van het
dode dier heen. En daarna het fixatief, waardoor je alles van
binnenuit fixeert. Kan alleen als het dier net dood is en het
bloed nog niet gestold is in de aderen.
o Immersiefixatie: Je snijdt een stukje weefsel af en stopt dat in het fixatief. De
buitenkant wordt langer gefixeerd dan de binnenkant. Hierdoor moet je kleine
stukjes afsnijden,
,Snijden van weefsel = vak apart
HE met snijaftefact (slecht mes) HE met gaten in het weefsel
(te snel snijden)
Weefsel preparen: Kleuren
Doel: specifiek weefseltypen/eiwitten zichtbaar maken
Twee type kleuring:
Histochemie Immunohistochemie
- Chemisch -Immunologisch
- Hematoxyline en esoine (HE)
- Periodic acid-schiff reaction (PAS)
- Sundan Black (vetten)
- Metal impregnation (vezels in bijv. Zenuwweefsel).
HE-kleuring (de basis kleuring van de histologie)
Eosine – roze – zure kleuring - kleurt acidofiele (= ‘basische’) celcomponenten
Hematoxyline – paars/blauw – basische kleuring – kleurt basofiel (=’zure’) celcomponenten
• Basische celcomponenten: DNA (nucleus), RNA rijke gebieden in het cytoplasma, matrix
in kraakbeen.
• Zure celcomponenten: cytoplasma, collageen
PAS-kleuring
Schiff’s reagent reageert met de hexose-ringen van polysacchariden.
Van kleurloos naar intens rood.
Bijv. muceus weefsel (slijm)
Vaak tegen gekleurd met HE, zorgt voor een completer beeld.
, Sudan Black
• Vetoplosbare kleurstof, dus kleurt weefsels met veel vet: vezelbanen, vetweefsel.
• Wordt gebruikt voor diagnose van specifieke metabole aandoeningen, waarbij vetten
intracellulair ophopen.
Metaal-kleuring: Golgi
• Zilverkleuring, na impregnatie van het weefsel met o.a. zilvernitraat, wordt het weefsel
behandeld zodat het zilver wordt gereduceerd en zichtbaar is in de neuronen.
• Kleurt neuronen aspecifiek
• Kleurt niet alle neuronen, daarom zo geschikt voor bestuderen van morfologie van
neuronen.
Immunohistochemie
• Immuno = antilichamen (antibodies)
• Het wordt niet alleen voor lichtmicroscopie toegepast, maar ook voor fluorescentie
microscopie en western blot (eiwitdetectie).
Principe: Antilichamen zijn selectief voor een epitoop op een specifiek eiwit.
Antigen is specifiek voor het antilichaam.
o Direct: Het antilichaam wordt gelabeld met een marker. Zo kan je het eiwit waar je
geïntresseerd in bent bekijken.
o Indirect: Stukje weefsel met het eiwit waar je naar wil kijken. Het primaire
ongelabbelde antilichaam bindt op het antigen. Het secondaire gelabelde antilichaam
bindt aan het primaire antilichaam. Er binden er vaak meerderen waardoor er meer
kleur komt op de plek van het eiwit.
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller roosbrink. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $4.82. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
67474 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now