Chromatografie = analysetechniek voor scheiding of zuivering van kleine
hoeveelheden sterk verwante substanties zonder ontleding of nevenreacties
• Scheiding door selectieve verdeling van componenten tussen 2 fasen
MOBIELE fase (MF) stroomt langs STATIONAIRE fase (SF)
• Verschillen in verdeling/aantrekking tot deze fasen
Componenten van mengsel gaan met ≠ snelheden door
chromatografisch systeem
Scheiding van componenten
• Componenten lossen altijd op in MF (worden meegevoerd)
• Hoe sterker aangetrokken door stationaire fase, hoe meer vertraging
van deze component
DOEL: scheiden van verbindingen
Op basis hiervan concentratie bepalen van verbindingen
Ook identificatie: maat voor retentie is specifiek voor een stof
1.2 INDELING NAARGELANG DE SOORT CHROMATOGRAFIE
1. VERDELINGSCHROMATOGRAFIE
• Componenten verdelen over vloeibare SF en MF
Afhankelijk van oplosbaarheid van deze fases
≠ componenten op ≠ manier
• Componenten kunnen zich dus in de SF begeven
1
, • Nernst: “opgeloste stof verdeelt zich over 2 beperkt of niet-mengbare
oplosmiddelen in een constante verhouding”
Verhouding aangeduid met verdelingscoëfficiënt k
= constante
Verdelingscoëfficiënt k
- Karakteristieke grootheid voor bepaalde stof in bepaald systeem
- Hoe hoger k, hoe meer affiniteit de component heeft voor de SF
- Temperatuurafhankelijk
- Onafhankelijk van totale concentratie
=> Verdelingsisothermen bekomen
Isotherm = geeft verhouding weer tussen concentratie van stof X in stationaire
fase tov concentratie van stof X in mobiele fase
• Componenten verdelen over SF en MF
• Component lost weinig op in SF = sneller van kolom = kleine K
Fig 2a: stof A lost best op in SF, dus hoogste K-waarde
Fig 2a: stof C zal het snelste uit de kolom gaan en dus de 1 e piek zijn
2. ADSORPTIECHROMATOGRAFIE
2
, • Stoffen kunnen niet in SF oplossen
Blijven op grensvlak hangen, aan SF (adsorberen)
• Analyt is in vloeistof opgelost, maar adsorbeert via fysische interacties met
SF
Hierbij is SF ofwel vaste fase ofwel fase die chemisch gebonden is aan
vaste fase
Vb. silica dunnelaag chromatografie, hydrofobe interactie
chromatografie …
• Componenten sterk gebonden aan absorbens (SF): sterkst afgeremd
Polariteit: bij apolair absorbens = apolaire stof sterk afgeremd als
eluens polair is
• Isotherme verschilt ook van verdelingschromatografie (zie tabel)
Isotherme bij Isotherme bij
verdelingschromatografie adsorptiechromatografie
Afhankelijk van … Afhankelijk van …
… eigenschap van stof … eigenschap van stof
… temperatuur … temperatuur
… concentratie van stof
Isotherm buigt af eens grensvlak
verzadigd is
3. GELFILTRATIE
• Eenvoudiger en sneller dan andere scheidingsmethodes
• Scheiding door mengsel op te brengen op kolom gevuld met verzadigde
Sephadex-bolletjes (poreuze bolletjes)
Mengsel door kolom gespoeld (geëlueerd) met oplosmiddel
Grote moleculen kunnen niet doordringen in poriën van SF (dus als 1 e
door kolom)
Kleine moleculen diffunderen in en uit poriën (dus vertraagd, als
laatste door kolom)
3
, 1.3 INDELING VAN DE CHROMATOGRAFIE NAARGELANG DE FASEN
Tabel: indeling van chromatografie naargelang fasen van MF en SF
MF SF Type Letterc Benaming
ode
Gas Vloeist Verdeli GLC Gas-vloeistof-chromatografie
of ng
Gas Vast Adsorp GSC Gas-vast-chromatografie
tie
Vloeist Vloeist Verdeli LLC Vloeistof-vloeistof-chromatografie
of of ng
Vloeist Vast Adsorp LSC Vloeistof-vast-chromatografie
of tie
1.4 DUNNELAAG EN PAPIERCHROMATOGRAFIE
Papierchromatografie
- Papier = draagmiddel
- Scheiding door verdeling van componenten tussen water aan cellulose
gebonden en eluens
- Onderdompeling van uiteinde papier: vloeistof wordt door capillaire krachten
opgezogen
Componenten van mengsel met ≠ snelheid meegesleurd (afh. van
hydrofoob karakter)
- Kleuren die minst affiniteit met papier vertonen en meest met loopvloeistof:
verst migreren
Dunnelaagchromatografie
4
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller febedauwe. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $8.06. You're not tied to anything after your purchase.