Class notes
Hoofdstuk 2
- Course
- Institution
Dit zijn mijn college aantekeningen, heel handig om zelf een samenvatting van te maken!
[Show more]
Seller
Follow
lisaankersmit
Reviews received
Content preview
Les 2DNA-isolatie – Doelen
In het forensische onderzoek hebben we niet te maken met ideale stalen (voorbeeld van een ideaal
staal is een bloedname bij een patiënt, hier zit sowieso DNA in), we vinden namelijk allerhande
sporen terug en het DNA kan niet altijd optimaal zijn door de invloed van bijvoorbeeld niet humaan
DNA, bacteriën, schimmels, etc.. Daarom scheiden we het DNA van al de rest zodat niets kan
interfereren met de downstream processen. In het forensische onderzoek zijn er dus verschillende
doelen voor het isoleren van het DNA:
DNA scheiden van andere cellulaire moleculen en niet-cellulaire componenten, denk aan
eiwitten en vetzuren, enzymen zoals DNAsen, chemische stoffen in kleding en metaalionen
en silicium (zand). De chemische stoffen in kleding en metaalionen en silicium zijn eigen aan
de forensische biologische sporen
Verwijderen van potentiële inhibitoren. Denk aan hemoglobine in het bloed, melanine in de
haren en chemische stoffen in kleding (in jeans kleiding kunnen er chemische stoffen zitten
die kunnen interfereren met de latere PCR reactie)
Preventie van verdere degradatie van het DNA
Concentratie van het DNA in een klein volume
Het is natuurlijk belangrijk dat wij zo veel mogelijk DNA uit de sporen kunnen halen. Maar, sommige
sporen bevatten niet veel DNA. We moeten dus de rest weghalen, zodanig dat de concentratie DNA
hoog genoeg is zodat we verder kunnen werken.
DNA-isolatie – Klassieke methoden
Bij de organische extractie wordt het spoor gemengd met een oplossing van water en fenol,
chloroform en isoethyl alcohol. Hierdoor zullen DNA en eiwitten gescheiden worden. Het voordeel
van organische extractie is dat het een bewezen methodologie is. Echter is dit een tijdrovende
procedure, waarbij er veel transfers plaatsvinden. Daarnaast worden er toxische organische stoffen
gebruikt (denk aan chloroform) en is er kans op introductie van contaminatie en kans op verlies van
DNA. Deze procedure kan niet geautomatiseerd worden. Chelex is de stof die men toevoegt aan de
oplossing en deze stof zorgt ervoor dat bepaalde ionen gecapteerd worden die mogelijk een
bewerking hebben op de PCR reactie. Dus, het spoor wordt opgewarmd waardoor de cellen lyseren
chelex wordt toegevoegd en die zal de ionen kapteren. De voordelen van het gebruik van chelex
zijn dat het snel en goedkoop is. we zien hier minder kans op de introductie van contaminatie. Maar,
Pagina 1 van 11
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller lisaankersmit. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $12.34. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
72042 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now