Essay
Biochemie labo: Tweecomponenten analyse van NAD en NADH/ chemie-biochemie
- Course
- Institution
Verslag van het labo tweecomponenten analyse van NAD en NADH voor het vak biochemie
[Show more]
Seller
Follow
antonmartens
Reviews received
Content preview
2021/2022Tweecomponentena
nlyse van NAD en
NADH
BIOTECHNOLOGIE 3CB
[BEDRIJFSNAAM] | [Bedrijfsadres]
, 3CB uitvoering labo: 18/10/2021
Inhoud
1. Inleiding..............................................................................................................................................2
1.1 Doel..............................................................................................................................................2
2. Procedure...........................................................................................................................................3
2.1 Reagentia......................................................................................................................................3
2.1.1 Fosfaatbuffer (1000 mL)........................................................................................................3
2.1.2 -stockoplossing (25 mL).........................................................................................................3
2.1.3 NADH -stockoplossing (25 mL)...............................................................................................3
2.1.4 -standaarden (telkens 25 mL)................................................................................................3
2.1.5 NADH -standaarden (telkens 25 mL)......................................................................................4
2.1.6 / NADH -standaard (25 mL)....................................................................................................4
2.1.7 Opmerkingen.........................................................................................................................4
2.2 Werkwijze.....................................................................................................................................4
3. Berekeningen......................................................................................................................................5
3.1 Fosfaatbuffer 0,05M met pH 7,40 (1000 mL)................................................................................5
3.2 - stockoplossing 0,05 M (1000 mL)..............................................................................................6
3.3 – stockoplossing 0,05 M (1000 mL)..............................................................................................6
3.4 - stockoplossing (25 mL) M in 0,05 M fosfaatbuffer pH 7,40........................................................6
3.5 NADH- stockoplossing (25 mL) M in 0,05 M fosfaatbuffer pH 7,40...............................................6
3.6 -standaarden (25 mL per standaard) in 0,05 M fosfaatbuffer pH 7,40.........................................7
3.7 NADH -standaard in 0,05 M fosfaatbuffer pH 7,40.......................................................................7
3.8 /NADH- standaard (25 mL)...........................................................................................................8
4. Resultaten...........................................................................................................................................9
4.1 Absorbanties van , NADH en /NADH.............................................................................................9
4.2 Absorbanties van de 5 -standaarden..........................................................................................10
4.3 Absorbanties van de 5 NADH-standaarden................................................................................12
4.4 /NADH-standaard.......................................................................................................................14
4.5 Bepaling van de onbekende........................................................................................................15
5. Besluit...............................................................................................................................................16
Referentielijst.......................................................................................................................................16
Bijlage...................................................................................................................................................17
Instructies.........................................................................................................................................17
Absorbantiespectrum , NADH en /NADH..........................................................................................19
1
, 3CB uitvoering labo: 18/10/2021
Absorbanties.....................................................................................................................................20
Absorbanties NADH..........................................................................................................................21
Absorbanties Onbekende.................................................................................................................21
1. Inleiding
Een oplossing die twee componenten bevat die onderling geen interactie vertonen, is een
oplossing waarvan de lichtabsorbantie additief is. Dit betekent dat de totale absorbantie van
het mengsel met de twee componenten bij elke golflengte gelijk is aan de som van de
afzonderlijke absorbanties van component 1 en component 2.
Stel dat er geen interactie is tussen de twee componenten van het mengsel dan kunnen de
concentraties van de componenten bepaald worden aan de hand van spectrofotometrische
metingen bij twee verschillende golflengte. Deze golflengten zijn zodanig gekozen dat bij
elke golflengte één van beide componenten sterk en de andere zwak absorbeert. Uit de
absorbantiespectra kunnen de meest geschikte golflengten afgeleid worden.
De concentraties van de componenten in het mengsel kunnen berekend worden aan de
hand van de wet van Lambert-Beer.
Ai= j ij .d . Cj
Waarbij:
A = Absorbantie
ε = molaire absorbantiecoëfficiënt (L/mol.cm)
d = lichtweg (cm)
i = golflengte aanduiding
j = component aanduiding
C = concentratie (mol/L)
Aangezien er twee verschillende golflengten worden gemeten geldt het volgde stelsel:
Ai=ε 11∗d∗C1 + ε 12∗d∗C 2
Ai=ε 21∗d∗C1 + ε 22∗d∗C 2
In het stelsel zijn C 1 en C 2 onbekend. De 4 molaire absorbantiecoëfficiënten kunnen bepaald
+¿ ¿
worden met behulp van de ijkcurven voor NAD en NADH.
1.1 Doel
Het doel van deze proef is om de concentratie van NAD+¿ ¿ en NADH te bepalen. Hierbij
zullen eerst twee golflengten bepaald worden door standaardreeksen op te stellen, een
+¿ ¿ +¿ ¿
NAD -standaardreeks, een NADH-standaardreeks en een NAD /NADH-standaardreeks.
+¿ ¿
Naast het bepalen van de concentraties van NAD en NADH wordt ook een onbekende
+¿ ¿
gegeven. Deze onbekende wordt bereid vanuit de NAD en NADH stockoplossingen.
2
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller antonmartens. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $8.58. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
52928 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now