Summary
Samenvatting Histopathologie
- Course
- Institution
Samenvatting van de lessen aangevuld met eigen nota's
[Show more]
Seller
Follow
dedeny
Reviews received
Content preview
1Samenvatting: Inleiding tot de Pathologie
van de Mond: Histopathologie:
Pathologie:
• Synoniem voor ziekteleer
o Wetenschap dat het ontstaan van ziekten bestudeerd
Pathologische anatomie:
• Specialisme van de pathologie
• Synoniem voor histopathologie
o Studie van de weefsels aangetast door ziekte
• Nadruk ligt bij het diagnosticeren van ziekten
o Belangrijkste manier om te onderzoeken is de microscoop
• Heden:
o Start van onderzoek van biopt start met microscoop
▪ Zal toelaten om goede hypothese te formuleren over aard van letsel
o Eventuele aanvulling met gespecialiseerde technieken
▪ Op eiwitniveau
▪ Op DNA-RNA-niveau
• Nemen van een biopsie zal vaak zorgen voor een zekerheidsdiagnose van talrijke
gelokaliseerde aandoeningen
Voorbeeld:
• Invasief plaveiselcelcarcinoma
o Belangrijkste maligne tumor in hoofd-hals-regio
• Diagnose meestal met zekerheid gesteld op hematoxyline en
eosine gekleurde coupe
Soorten biopsies:
• Incisiebiopsie:
o Letsel wordt ingesneden en chirurgisch nemen van een
biopt uit het letsel
• Excisiebiopsie:
o Letsel wordt volledig uitgesneden
• Resectie:
o Vooral grote biopsies
o Letsel of orgaan met letsel wordt weggenomen
• Punctiebiopsie:
o Biopsie wordt afgenomen met een dikke naald
▪ Verkrijgen van weefselcilinders
• Cytologische punctie:
o Fine needle aspiration cytology
o Verkrijgen van cellen of kleine weefselfragmentjes met fijne naalden
Inleiding tot de Pathologie van de Mond: Histopathologie
, 2
Maken van weefselcoupes:
• Maken, kleuren en bekijken van coupes gebeurt in 4 stappen
o Van biopsie naar paraffineblokje
o Van paraffineblokje naar ongekleurde coupe
o Van ongekleurde coupe naar gekleurde coupe
o Van gekleurde coupe naar microscopische coupe
Preparatie van kleine biopsies:
• Biopsies genomen door een endoscoop uit maag of bronchus
• Worden gefixeerd in formol (4% formaldehyde)
o Minstens 2 uur
• Worden in plastieken cassetje gebracht
• Cassetje wordt gesloten
Preparatie van resectiestukken:
• Resectiestukken zijn te groot om in cassetje te plaatsen
o Zal verkleind worden en er worden gericht biopsies
genomen
• Rectum als voorbeeld (afbeelding):
o Rectum zal dwars opgesneden worden
▪ Mogelijkheid om gericht biopsies te nemen
o Genomen biopsies worden in cassetjes aangebracht
Maken van paraffineblokje:
• Weefsel moet hard genoeg zijn om weefselsneden van te maken
o Maken van paraffineblokje
• Cassetjes worden overnacht geïmpregneerd met paraffine in weefselprocessor
o Water in weefsel wordt vervangen door alcohol
▪ Vervolgens vervangen door organische solvents
• Vervolgens kan vetoplosbaar paraffine in het weefsel binnendringen
• Geïmpregneerde stukken weefsel worden in metalen vorm gelegd en omgeven met
gesmolten paraffine
• Na afkoelen wordt paraffineblokje uit de vorm gehaald
Van paraffineblokje naar ongekleurde coupe:
• Na impregnatie met paraffine is weefsel hard genoeg
o Mogelijkheid tot maken van coupes met dikte van minder dan 5 µm
o Gebeurd met het weefselmicrotoom
• Ongekleurde coupes worden aangebracht op een draagglaasje
o Coupes zijn transparant en moeten dus gekleurd worden
▪ Transparante coupes zijn niet zichtbaar onder de microscoop
Van ongekleurde coupe naar gekleurde coupe:
• Ongekleurde coupe zal gekleurd worden met HE-kleuring of PAS-kleuring
• Na kleuring kan de coupe bekeken worden onder de microscoop
Inleiding tot de Pathologie van de Mond: Histopathologie
, 3
Hematoxyline en eosine kleuring:
• Standaardkleuring voor het kleuren van coupes met histochemische kleurstoffen
o Meeste afbeeldingen zijn HE-gekleurd
• Hematoxyline:
o Blauwe basische kleurstof
o Bindt vooral met zuren
▪ DNA en RNA
o Kernen en RNA zullen blauw kleuren
• Eosine:
o Roze ‘zure’ kleurstof
o Cytoplasma en extracellulaire collageenvezels zullen roos kleuren
o Rode bloedcellen zullen intens roos kleuren
PAS-kleuring:
• Kleurstof zal suikerresidu’s kleuren in polysachariden
o Kleuren van glycogeen en suikerresten van glycoproteïnen
• Zal gebruikt worden voor:
o Basale membraan of slijm in het licht te stellen
o Schimmels en gisten aan te duiden
Paraffineblok:
• Zeer lang goed bewaard
o Deel van medisch dossier van patiënt
o Wordt gedurende 30 jaar bewaard
• Meerdere analyses mogelijk op het blokje:
o Kleuring (zie boven)
o Immuunhistochemie
o Fluorescentie in situ hybridisatie (FISH)
o Extractie van DNA en RNA voor moleculaire analyse
Immuunhistochemie:
• Doel:
o Aanwezigheid aantonen van bepaalde moleculen in cel
• Gebruikmaken van specifieke antilichamen om specifieke moleculen
aan te tonen in de cel
o Antilichaam is rechtstreeks of onrechtstreeks (meestal) verbonden met een enzym
▪ Zal oplosbaar substraat omzetten naar onoplosbaar precipitaat
• Precipitaat zal neerslaan ter hoogte van het aan te tonen eiwit in de
cel
• Precipitaat heeft vaak bruine kleur
o Zie afbeelding
• Afbeelding:
o Antilichaam tegen keratine zal keratine aantonen in
cytoplasma van epitheelcellen
▪ In dit geval clusters maligne epitheelcellen
Inleiding tot de Pathologie van de Mond: Histopathologie
, 4
Immunofluorescentie:
• Variant van immuunhistochemie
• Antilichaam is niet gelabeld met een enzym
o Antilichaam is rechtstreeks of onrechtstreeks gelabeld met een fluorochroom
• Zeer gevoelige techniek
o Aantonen van genen die weinig overvloedig aanwezig zijn
o Wordt toegepast op vers materiaal
Fluorescentie in situ hybridisatie:
• Zeer elegante techniek
o Gebruikmaken van DNA-fragmenten (probes) complementair aan een DNA-segment
in de celkern
▪ DNA-segment kan gen, deel van gen of groter deel van chromosoom zijn
• Probes zijn gelabeld met een fluorescente stof
• Door denaturatie van DNA (dubbelstrengig naar enkelstrengig) kan probe binden met streng
van DNA
o Zo aantonen van aanwezigheid van bepaald DNA-segment
• Fluorescentiemicroscoop is nodig om techniek te laten werken
Chromogene in situ hybridisatie:
• Zelfde techniek als FISH, maar:
o Probes worden gelabeld met een chromogeen
▪ Niet-fluorescerende stof
o Kan gebruikt worden onder gewone lichtmicroscoop
Extractie van DNA en RNA voor moleculaire analyse:
• Via microtoom worden stukjes weefsel afgesneden uit paraffineblok
o Extractie van DNA en RNA voor verdere moleculaire analyse
▪ Voor bijvoorbeeld sequencing of PCR
• Belangrijk bij tumordiagnostiek voor het detecteren van mutaties
Fine needle aspiration technology:
• Biopten worden op speciale manier behandeld
o Worden gefixeerd in alcohol in plaats van formol
o Zichtbare brokjes worden na fixatie uit de recipiënt gevist
▪ Zal dan verder behandeld worden als paraffineblokje
• Van de losse cellen wordt met een speciaal toestel een dunnelaag-preparaat gemaakt
o Wordt klassiek gekleurd met een Papanicolaou-kleuring
• Van sediment (overschot) kan eventueel tweede paraffineblokje gemaakt worden
o Aanvullende onderzoeken zijn eveneens mogelijk
• Veel gebruikt in hoofd-halsregio
o Klieren zijn makkelijk aan te prikken met dunne naald
Inleiding tot de Pathologie van de Mond: Histopathologie
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller dedeny. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $11.32. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
73918 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now