Exam (elaborations)
Meetrapport transformatie MBE
- Course
- Institution
Meetrapport voor praktijkvak MBE over transformatie. Alles is uitgewerkt volgens het beoordelingsmodel.
[Show more]
Seller
Follow
isabeldevette
Reviews received
Content preview
MBE Meetrapport TransformatieLeerjaar 2 Biologie en Medisch Laboratoriumonderzoek MBE
Doel Transformatie
Het doel van transformatie is het inbrengen van vreemd DNA in een gastheer. In dit geval gaat het
om het inbrengen van de nieuwe plasmide in competente E.coli DH5α bacteriën. Bacteriën kunnen
zich snel voortplanten, waardoor het ingebrachte DNA zich ook snel vermenigvuldigt. Door middel
van deze transformatie zal het fusie-eiwit (H2B en GFP) in grote hoeveelheden worden
geproduceerd.
Voor de transformatie is gebruik gemaakt van de heat-shock-methode. Door de heat-shock worden
de celmembranen van de bacteriën geopend. Door deze opening kan de nieuwe plasmide worden
opgenomen in de bacteriën.
De transformatie wordt uitgevoerd om te controleren of de digestie en ligatie van de plasmide en het
H2B-product succesvol zijn verlopen. Als dit het geval is, kan de plasmide worden vermenigvuldigd
door de bacteriën. Hiermee kan vervolgens worden verder gewerkt, om o.a. te controleren of de
insertie aanwezig is.
Verwachting Transformatie
Plaa Wat is er uitgeplaat? Voedingsbode Verwachting*
t m
1 10 µl van ligatiemengsel 1: H2B Ampicilline Er wordt groei van
product met plasmide (pDM317) bodem kolonies verwacht.
100 µl competente E.coli DH5α
bacteriën
2 10 µl van ligatiemengsel 2: Ampicilline Er wordt weinig tot
opengeknipte en geCIPte bodem geen groei van
plasmide kolonies verwacht.
100 µl competente E.coli DH5α
bacteriën
3 1 µl van de ongeknipte plasmide Ampicilline Er wordt groei van
Positieve
controle
(zonder H2B) bodem kolonies verwacht.
100 µl competente E.coli DH5α
bacteriën
4 100 µl competente E.coli DH5α Ampicilline Er wordt geen
Negatieve
controle bacteriën bodem groei van kolonies
verwacht.
5 100 µl competente E.coli DH5α Bodem zonder Er wordt groei van
Negatieve
controle bacteriën ampicilline kolonies verwacht.
Tabel 1: verwachtingen van de transformatie
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller isabeldevette. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $6.95. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
71498 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now