PLANTEN BIOTECHNOLOGIE
Samenvatting Theorie
PLANTENTRANSFORMATIE
§ Plantentransformatie en –regeneratie
§ ≠ transformatiemethoden
• biologisch vs fysicochemisch
• doelweefsel
§ weefsel explantaten
§ protoplasten
§ callus
§ somatische embryo’s
§ gehele plant, bloeiwijze, blad, stengel
• regeneratie (on-)afhankelijk
§ vb callus
§ nadeel: verschillende soorten callus die anders kunnen
reageren ifv transformatie- e regeneratiecapaciteit
§ nadeel: somaklonale variatie (accumulatie van mutaties en
epigenetische veranderingen)
§ voordeel: 1 cel è 1 plant (dus geen kans op chimeren)
§ regeneratie onafhankelijke hebben als voordeel dat ze geen
problemen hebben met regeneratie of somaklonale variatie.
Nadeel is hier dat men vertrekt vanuit een weefsel en slechts 1
cel wordt getransformeerd è chimeren (om hier
getransformeerde lijnen uit te halen moet men nakomelingen
zoeken afkomstig uit de L2 laag van de moederplant
§ sommige methoden zijn regeneratieonafhankelijk en hebben
geen problemen met chimeren
• in planta methoden voor A.tumefaciens waarbij via
vacuuminfiltratie = floral dip de bloeiwijzen en meer
specifiek de vrouwelijke gameten worden getransformeerd
• transgeen vs chimeer
§ transgene dochterplanten kunnen uit een chimeer voortkomen
als de L2 laag getransformeerd is
• primaire transformant = hemizygoot
• transient vs stabiel
§ het is niet omdat DNA binnengeraakt in een cel, dat het stabiel
zal integreren
• Regeneratie onafhankelijke methoden
§ Meristeemtransformatie
• In situ of na excisie
• Zorgt voor chimeren (è enkel nakomelingen selecteren uit L2)
• Arbeidsintensief en weinig efficient
• Genotype onafhankelijk en geen somaklonale variatie
§ Vanuit somatische embryo’s
§ Floral Dip
1
Samenvatting Theorie
PLANTENTRANSFORMATIE
§ Plantentransformatie en –regeneratie
§ ≠ transformatiemethoden
• biologisch vs fysicochemisch
• doelweefsel
§ weefsel explantaten
§ protoplasten
§ callus
§ somatische embryo’s
§ gehele plant, bloeiwijze, blad, stengel
• regeneratie (on-)afhankelijk
§ vb callus
§ nadeel: verschillende soorten callus die anders kunnen
reageren ifv transformatie- e regeneratiecapaciteit
§ nadeel: somaklonale variatie (accumulatie van mutaties en
epigenetische veranderingen)
§ voordeel: 1 cel è 1 plant (dus geen kans op chimeren)
§ regeneratie onafhankelijke hebben als voordeel dat ze geen
problemen hebben met regeneratie of somaklonale variatie.
Nadeel is hier dat men vertrekt vanuit een weefsel en slechts 1
cel wordt getransformeerd è chimeren (om hier
getransformeerde lijnen uit te halen moet men nakomelingen
zoeken afkomstig uit de L2 laag van de moederplant
§ sommige methoden zijn regeneratieonafhankelijk en hebben
geen problemen met chimeren
• in planta methoden voor A.tumefaciens waarbij via
vacuuminfiltratie = floral dip de bloeiwijzen en meer
specifiek de vrouwelijke gameten worden getransformeerd
• transgeen vs chimeer
§ transgene dochterplanten kunnen uit een chimeer voortkomen
als de L2 laag getransformeerd is
• primaire transformant = hemizygoot
• transient vs stabiel
§ het is niet omdat DNA binnengeraakt in een cel, dat het stabiel
zal integreren
• Regeneratie onafhankelijke methoden
§ Meristeemtransformatie
• In situ of na excisie
• Zorgt voor chimeren (è enkel nakomelingen selecteren uit L2)
• Arbeidsintensief en weinig efficient
• Genotype onafhankelijk en geen somaklonale variatie
§ Vanuit somatische embryo’s
§ Floral Dip
1
