Summary
Samenvatting 12 Gentechnologie
- Course
- Institution
dit is een samenvatting van het van Microbiologie hoofdstuk 12 Gentechnologie deze samenvatting bevat 4 pagina's er zijn ook oefenvragen met antwoorden beschikbaar voor dit vak
[Show more]
Seller
Followsaarvercammen
Reviews received
Content preview
Hoofdstuk 12 Gentechnologie komt na microbiologie Biotechnologie maakt gebruik van micro-organismen in een zeer ruime
context.
Dit laat toe om op industriële schaal een aantal producten te produceren
zoals:
o Antibiotica (penicilline, tetracycline, …)
o Enzymen (glucose isomerasen, proteasen, lipasen, …)
o Voedseladditieven (vitaminen, aminozuren, …)
o Chemicaliën (bioethanol, biodiesel, citroenzuur, aspartaam, …)
Onderdeel: moleculaire biologie
Genetische manipulatie mogelijk in MO en in planten
12.1 Restrictie-enzymen
Cruciale ontdekken in jaren 70
Restrictie-enzym / restrictie endonuclease = eiwit geproduceerd door
bacteriën
Eiwit is in staat bepaalde korte sequentie van 4-6 basen te herkennen in DNA-
molecule daarbinnen op specifieke manier knippen DNA in kleinere
fragmenten opgesplitst
Namen verwijzen naar bacterie waarvan afkomstig : bv ECO R1 E. coli , Taq I
1e RE geïsoleerd uit Thermus aquaticus
Gevonden in bacteriën + verdedigingsfunctie tegen
bacteriofagen
Na injectie viraal DNA direct in stukken geknipt door
bacterieel RE
Bacterieel genoom wordt beschermd (op bepaalde plaatsen
gemethyleerd), zodat knipenzymen daar werkzaam zijn.
Voordeel : men weet exact wat de uiteinden van de DNA-fragmenten zijn
Vaak enkelstrengige overhangen die complementair zijn aan elkaar = sticky
ends
Onmisbaar voor moleculaire biologie
Van verschillende bronnen met hetzelfde RE geknipt DNA fragmenten met
complementaire sticky ends aan elkaar kleven = recombinante DNA-
molecule
DNA mens knippen met ER (gem lengte =3000 bp) milioen fragmenten
Aantal/groote verschild per individu door mutaties knipplaatsen
wegvallen/bijkomen
RFLP’s = restrictie-fragment-lengte polymorfismen = de individuele
verschillen in aantal en plaats van de kinpplaatsen
Toepassingen :
o DNA-fingerprinting
o Kloneren
1
, 12.2 TAQ DNA-polymerase
Taq-polymerase = ander belangrijk enzym dat in bacterie zit
Thermostabiel enzym
DNA-polymerase uit thermofieke bacterie Thermus aquaticus leeft in
warmwaterbronnen + overleeft in kokend water
Sleutelrol bij : PCR-techniek = ploymerase chain reaction + DNA-synthese
Exponentieel vermenigvuldigen van één specifiek DNA -fragment (= target
sequence)
PCR-techniek :
Verschillende cycli na elkaar
Tijdens elke cyclus 3 fasen:
1. Denaturatie dsDNA: stijgen temperatuur dsDNA wordt ssDNA
2. Annealing: dalen temperatuur vasthechten primers aan complementaire
sequenties
3. Extension: stijgen temperatuur aanmaak complementaire DNA-strengen
door Taqpolymerase
DNA-polymerase : eigenschap activiteit start pas als er al een begin is
gemaakt
Aan DNA-polymerase wordt stukje ssDNA gebonden in buurt DNA-gedeelte dat
men wilt vermenigvuldigen
Eerst sequentie kennen van ongeveer 20 basen aan beide kanten DNA stukje
Chemische weg maken stukjes ss DNA die op korte basesequenties passen
= primers
Primers in overmaat toegevoegd aan mengsel A, C, G, T bouwstenen + DNA-
fragment
Primers binden aan ds DNA dsDNA gedenatureerd tot 2 enkelvoudige
strengen t = +90°C
Proces in cycli van verwarmen en afkoelen elke cyclus nieuw DNA-
polymerase toegevoegd
Taq DNA polymerase - stabiel tot boven 90 °C volstaat 1 keer enzym
toevoegen
Hoge kostprijs enzyme groot verschil practische bruikbaarheid
Genetisch gemanipuleerd E. coli-stam in staat recombinant Taq DNA-
polymerase produceren
2
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller saarvercammen. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $3.21. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
67474 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now