Summary
Samenvatting - Labo microbiologie toets 1
- Course
- Institution
samenvatting van de biochemische testen
[Show more]
Seller
Followcharlottekindt
Content preview
LABOLEVENSMIDDELENMICROBIO
2 BIOCHEMISCHE KENMERKEN
Studie biochemische kenmerken van de kiem
= Goed inzicht in de activiteiten van de verschillende enzymen die een kiem kan bezitten,
hetzij intracellulair, hetzij exctracellulair
Belangrijk dat de kiem kan groeien voedingsbodem met een of meerdere extracten
Toevoeging van het substraat aan de voedingsbodem gebeurt meestal met de
voedingsstoffen
alles samen wordt gesteriliseerd
Beoordelen van biochemische testen:
nagaan van de aan- of afwezigheid van het enzym (al of niet omgezet zijn van het
substraat na incubatie)
nagaan van de vorming van een nieuw product uit het substraat
! Elke stofwisselingseigenschap is afhankelijk van een enzym, een micro organisme moet dus
een enzym hebben voor een bepaalde eigenschap !
inzicht krijgen in welke enzymen je kiem bezit
Voor aflezen van de testen adhv indicatoren of reagentia
om metabolische processen zichtbaar te maken
indien niet toxisch voor de kiem toegevoegd op moment van de bereiding
indien wel toxisch voor de kiem toegevoegd na incubatie
gebruikte indicatoren:
- Methylrood (pH-interval 4,4 rood – 6,2 geel)
- Broomcresolpurper (pH-interval 5,2 geel – 6,6 purper)
- Broomthymolblauw (pH-interval 6,0 geel – 7,6 blauw)
- Fenolrood (pH-interval 6,8 geel – 8,4 rood)
- Neutraalrood (pH-nterval 6,8 – 8)
1
,2.1 AANTONEN VAN ENZYMES (zuurstofbehoefte)
2.1.1 OXIDASE TEST
De test maakt een onderscheid tussen de enterobacteriaceae die oxidase – zijn en de andere
gramnegatieven die oxidase + zijn
Indien het co-enzym cytochroom C in de respiratieketen aanwezig is, kan dit aangetoond
worden met een kunstmatige e-donor (TPD)
TPD geeft zijn e aan cytochroom C, wat daardoor in gereduceerde toestand komt, terwijl
het kleurloze TPD geoxideerd wordt tot Würsters blauw
test wordt uitgevoerd adhv oxidase strips
belangrijk om bacteriën te nemen die op een neutrale voedingsbodem zijn gegroeid!
CYTOCHROOM Paarsverkleuring Cytochroom C
OXIDASE + TPD geeft zijn e aan aanwezig
cytochroom C, wat = obligaat aeroob
daardoor in
gereduceerde
toestand komt, terwijl
het kleurloze TPD
geoxideerd wordt tot
Würsters blauw
CYTOCHROOM GEEN paarsverkleuring Cytochroom C
OXIDASE - afwezig
2.1.2 KATALASE TEST
De test geeft meer informatie over de zuurstofbehoefte en wordt gebruikt om onderscheid te
maken tussen fecale streptococcus spp en facultatief anaeroben zoals enterobacteriaceae en
stapthylococcus
Katalase is een haemproteïne dat trivalent ijzer bevat als reactief bestanddeel
enzym zet waterstofperoxide (3%) om in water en zuurstof
Kiemen worden uitgesmeerd op een voorwerpglaasje en hierop brengt men een druppeltje
waterstofperoxide op
KATALASE + + Gasbellen (en evt Aerobe kiem
ook schuimvorming)
enzym zet
waterstofperoxide om
in water en zuurstof
Facultatief aerobe
-/ + kiem
KATALASE - -geen gasbellen Anaerobe kiem
2
, +/- Facultatief anaerobe
kiem
2.2 ZUUR EN GASVORMING UIT EEN SUIKER / AFBRAAK VAN KOOLHYDRATEN
2.2.1 KIA TEST (Kligler Iron Agar)
Deze test wordt gebruikt bij de identificatie van de enterobacteriaceae die steeds glucose
positief zijn
Voedingsbodem: KIA en bevat de voedende bestanddelen + twee vergistbare suikers, glucose
1g/l en lactose 10g/l + natriumthosulfaat + ijzer(lll)ammoniumcitraat
Indictaor = Fenolrood (pH-interval 6,8 geel – 8,4 rood en midden is 7,4)
Aflezing:
Suikers worden als koolstofbron gebruikt vooraleer de AZ uit het pepton afgebroken worden,
omdat suikers gemakkelijk assimileerbaar zijn en meer energie opleveren
Pepton kan enkel aeroob afgebroken worden
o ENKEL GLUCOSE vergist is:
- Kleine hoeveelheid zuur gevormd (Fenolrood slaat om naar geel)
- Zodra glucose opgebruikt is en er geen lactose is, wordt pepton afgebroken
AZ uit het pepton worden met de luchtzuurstof aan de tong oxidatief
gedeamineerd met vorming ammoniak en ketozuren, deze worden verder
afgebroken door de krebscyclus tot CO2 en H2O
zure reactie aan de tong is dus maar tijdelijk
è RODE TONG EN GELE STOMP
o ENKEL LACTOSE vergist is:
- Lactose 10x meer geconcentreerd dan glucose , zure reactie is dus blijvend
è GELE TONG EN STOMP
o GLUCOSE EN LACTOSE vergist zijn:
è GELE TONG EN STOMP
o GASVORMING:
- Vorming van gasbellen in en/of onder stomp
o ZWARTE VERKLEURING:
- Kiem is sulfietreducerend of vormt H 2S uit zwavelhoudende AZ
- Sulfietreducerende kiemen verbruiken automatisch ook glucose
3
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller charlottekindt. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $6.63. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
71498 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now