100% satisfaction guarantee Immediately available after payment Both online and in PDF No strings attached
logo-home
Samenvatting toolbox PCR $8.15   Add to cart

Summary

Samenvatting toolbox PCR

 1 view  0 purchase
  • Course
  • Institution

Samenvatting biotechnologie toolbox PCR

Preview 2 out of 5  pages

  • November 4, 2023
  • 5
  • 2023/2024
  • Summary
avatar-seller
1. PCR

1.1. Wat is PCR

 Polymerase Chain Reaction of
 polymerase ketting reactie
 Belangrijke biotechnologische tool om 1 stukje DNA (of RNA) in vitro miljoenen keer
te vermenigvuldigen in een korte tijd (een paar uur)
 PCR reactie lijkt erg op de replicatie van DNA zoals die in de natuur plaatsvindt
 DNA replicatie (zie knowledge 4.4): verdubbeling DNA bij celdeling
 PCR reactie = in vitro versie van DNA replicatie
 ! veel meer dan 2x
 Vermenigvuldiging stukje DNA tot miljarden kopijen
 kort tijdsbestek (2-3 uur)
 Diagnose ziekte, opsporen genen,…
 Identificatie bacteriën en virussen e.a. micro-organismen (bv. aantonen
ziekteverwekker)
 Forensisch onderzoek
 Authenticiteit levensmiddelen adhv DNA
 Authenticiteit levensmiddelen

1.2. Toepassingen




1.3. Ontdekking

 1983: PCR ontdekt door Kary Mullis
 1993: Nobelprijs scheikunde

, 1.4. Werking

 PCR: 1 cyclus
 Van 1 DNA kopie naar 2 kopieën
 PCR = kettingreactie
 Herhaling van de stappen
 30 a 40x cycli
 2-tal uur

1.4.1. Benodigdheden

 DNA template: bevat target DNA
 Primers: enkelstrengig of single-stranded (ssDNA) die target DNA afbakenen
 DNA polymerase: (vgl DNA replicatie), verlengen van keten
 Nucleotiden: (= dNTP’s) bouwstenen voor ketenverlenging
 Buffer
 Cycler: apparaat dat voor temperatuur schommelingen zorgt

1.4.2. 3 belangrijke stappen

 STAP 1 : denaturatie
 dsDNA (double stranded of dubbelstrengig) wijzigt in ssDNA zodat primers
kunnen hechten in volgende stap
 verhogen temperatuur tot 95°C mbv thermocyler

 STAP 2 : annealing (= hybridisatie)
 vasthechten van primers aan ssDNA
 Primers = ssDNA die target DNA afbakenen
 Telkens 2 primers = primerpaar: Forward primer & Reverse primer
 Temperatuur afhankelijk van primers 50 – 65°C

 STAP 3 : elongatie
 (= extension/ketenverlenging)
 nucleotiden worden ingebouwd om nieuwe (complementaire) DNA streng aan
te maken
 Temperatuursafhankelijk 70 – 74°C

The benefits of buying summaries with Stuvia:

Guaranteed quality through customer reviews

Guaranteed quality through customer reviews

Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.

Quick and easy check-out

Quick and easy check-out

You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.

Focus on what matters

Focus on what matters

Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!

Frequently asked questions

What do I get when I buy this document?

You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.

Satisfaction guarantee: how does it work?

Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.

Who am I buying these notes from?

Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller lorevanvreckem. Stuvia facilitates payment to the seller.

Will I be stuck with a subscription?

No, you only buy these notes for $8.15. You're not tied to anything after your purchase.

Can Stuvia be trusted?

4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)

80467 documents were sold in the last 30 days

Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now

Start selling
$8.15
  • (0)
  Add to cart