Summary
Samenvatting Inleiding tot biotechnologie en genetica (prof Deforce)
- Course
- Institution
Bevat alle informatie uit de les
[Show more]
Seller
Follow
Farma1912
Content preview
H1 : InleidingBiotechnologie: gebruik & manipulatie van biologische systemen ter bereiding natuurlijke
grondstoffen en biomassa
Biologisch systemen: micro-org; plantaardige/dierlijke cellen; enzymen geïsoleerd uit een
levend wezen
Niet: traditionele agricultuur en veeteelt
Fermentatie: synoniem voor gisting. Dit is de afbraak van organische stof zonder
tussenkomst van zuurstof (anaeroob)
Eerste periode
-Prehistorie-1850
-Onbewust gebruik van bacteriën en gisten bij de productie van levensmiddelen
Tweede periode
-Vanaf 1850
-Louis Pasteur ontdekt dat micro-org verantw zijn voor bepaalde chemische omzettingen
-Uitsluiting van contaminaties nog niet mogelijk
Derde periode
-Gebruik van aseptische technieken zuivere culturen
-Farmaceutische productie penicilline
Vierde periode
-Invoer recombinant DNA-technieken
-Doorbraak plant/dierlijke celculturen in productieprocessen
Biotechnologie ≠ recombinant DNA-technieken
- Biotechnologie is veel meer dan recombinant -DNA: Recom-DNA is een vb, een onderklasse
DNA manipuleren
-Gemanipuleerd DNA wordt op stabiele wijze in genoom ingebracht
-aanmaak specifieke eiwitten in industrielichaamseigen mol in grote hoeveelheden
gebruik:
1) neuro-endocriene boodschappers, lymfokines & bloedeiwitten
2) vaccins, monoklonale antilichamen & enzymen
Biologicals
=complex gnm…
-GEEN Klassiek gnm: via chemische synthese aangemaakt
-subklasse: biotech gnm: vb Insuline
Varkensinsuline: verschilt 1 AZ met humaan insuline
Immunogeniciteit
Risico op contaminaties met virale infecties
, Biotech insuline: geproduceerd in bacteriën. = humaan
insuline. Continue bron zonder risico op contaminaties
H2: Basisbegrippen/ technieken
in biotechnologie en genetica
2.1 DNA-RNA
2.1.1 DNA-structuur
Primaire structuur: polynucleotide-structuur
Polynucleotide:
à3’-5’-fosfordiëster binding tss nucleotide àsuiker-fosfaatskelet -> base gebonden op
C1’
Secundaire structuur: 2 anti-parallele ketens = Watson & Crick model
àH-bruggen tss complementaire base( A-T en G-C)
àChargaffregel:
Virussen : enkelstrenig DNA
àzelf complementariteitàvorming dubbele helix haarspeld structuur
Circulair DNA: bacteriële genomen, virussen, bacteriofagen
& plasmiden
-replicatie plasmide-DNA onafh. van replicatie bacterieel DNA
àOnevenredige verdeling van DNA over dochtercellen
2.1.2 Denaturatie-Renaturatie
Denaturatie
-thermisch (verwarmen)
-PH wijziging (sterk zuur/alkalisch)
-destabilisatie ureum/formamide: DNA gedurende langere periode enkelstrengig
houden
Reversibel proces
(↔ denaturatie van eiwitten = irreversibel proces)
o Tm-waarde/Tsmelt
= T waarbij helft basen in een duplex ongepaard zijn
àkenmerken
stijgt bij ↑ [G][T] gehalte : Meer H-bruggen ( GT: 3 H-bruggen ↔ AT: 2 H-bruggen)
, o Renaturatie
= bij temp 25 °C onder Tm-waarde
Detectie denaturatie: UV spectrofotometrie
o 260nm
o Dubbelstrenig:absorbeert minder bij 260nm
o Enkelstrenig:absorbeert meer bij 260nm
àBasen zijn verantw. voor UV-absorptie: door elkaars nabijheid in dubbelstreng
wordt absorbantie onderdrukt
o Tm:waar grafiek verticale stijging heeft
Detectie hoeveelheid DNA + onzuiverheden
1 OD (260 nm) = 50 μg/ml dubbesltrengig DNA
= 33 μg/ml enkelstrengig DNA
Zuivere DNA preparaten OD(260 nm)/OD(280 nm) = 1,8
à Afwijkend getal: onzuiver
à Er bestaan onzuiverheden die de afwijking zullen opheffen
Homologe renaturatie Heterologe renaturatie
Met een volledig compl. stuk identiek DNA Met een niet volledig identiek of
compl stuk DNA
Sneller indien conc. hoger Per mismatch daalt Tm met 1,4 gr
Kationen:↓elektrostatischafstoting
->renat->hogereTm
2.1.2 DNA-Replicatie
- Snelheid: 50-nucleotiden per sec
- Basisprincipe: DNA-baseparing & DNA-templating
- Enzym: DNA-polymerase
- dNTPs: deoxyribonucleotidetrifosfaten
- semi-conservatief: oude streng krijgt nieuwe streng
à replicatievork: asymetrisch -> leading & lagging streng
ontstaan: origins of replication (= DNA-seq 300 nucleotiden AT-rijk)
à initiator eiwit: binden hierop -> DNA-seq herkennen
à DNA-helicasen: binden aan initiator eiwit en halen dubbele helix uit elkaar
à Single-strand DNA-binding eiwit ( SSB): enkelstrenig DNA stabiel houden
à ringvormig eiwit: helpt DNA-polymerase vast te houden op de DNA-streng
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller Farma1912. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $8.39. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
82191 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now