Volledige uitwerking van het practicumverslag voor practicum 5 met leverhomogenaat. Afgelopen jaar is dit practicum gegeven in deel 2 van de cursus van Metabolisme.
Practicum 5&6: Leverhomogenaat LDH en GDH
Door Rosa Wassenaar (6093345) en Michelle Weesie (6157904) – groep 9 & 10
27 maart 2018 – Assisententen Lisa en Dorien
Voorbereidingsvragen
Ingeleverd op papier.
* Toevoeging antwoord vraag 6:
Onder (gedurende een tijd) niet gevoede omstandigheden maakt de lever glucose. Glucose
kan gemaakt worden uit pyruvaat dat uit lactaat gemaakt kan worden (LDH). De
reactierichting is dan van lactaat à pryuvaat en NAD+ wordt geoxideerd tot NADH + H+. Er
wordt door GDH glutamaat omgezet tot a-ketoglutaraat en hierbij wordt NAD+ geoxideerd.
a-ketoglutaraat is een intermediair van de Krebs-cyclus, hierdoor kan energie vrijgemaakt
worden.
Berekeningen ΔA/min, latentie en recovery
Berekening ΔA/min:
ΔA/min wordt eerst berekend per seconde en daarna omgerekend naar per minuut:
ΔA/min wordt voor PNS, Cyt en Mit voor + en – Triton op de volgende manier berekend:
𝐴(90) − 𝐴(15)
∆𝐴/ min = ∙ 60
75 𝑠
Zie ΔA/min berekening op ingeleverde papier
Berekening latentie%:
Latentie is het deel van de totale enzymactiviteit dat niet zichtbaar is. Op het formulier in de
bijlage is het latentie% als volgt berekend:
ΔA ΔA
met Triton − min zonder Triton
𝐿𝑎𝑡𝑒𝑛𝑡𝑖𝑒% = min
ΔA
min met Triton
Berekening recovery%:
De recovery is ten opzichte van PNS. De recovery is het % enzymactiviteit in een bepaald
compartiment. Op het formulier in de bijlage is het recovery% als volgt berekend:
ΔA
min in bepaalde fractie (+Triton)
𝑅𝑒𝑐𝑜𝑣𝑒𝑟𝑦% =
ΔA
min in PNS (+Triton)
, LDH: Lactaat-dehydrogenase
Absorptie bij 340 nm van LDH
Gemiddelde absorptiewaarden:
PNS Cyt Mit
A340 nm - Triton + Triton - Triton + Triton - Triton + Triton
15 s 1,812 1,232 1,082 1,056 1,550 1,316
30 s 1,460 0,914 0,707 0,772 1,549 1,304
45 s 1,184 0,674 0,455 0,512 1,548 1,287
60 s 1,027 0,513 0,343 0,348 1,545 1,270
75 s 0,975 0,431 0,302 0,249 1,542 1,256
90 s 0,961 0,396 0,294 0,209 1,541 1,240
Grafiek 1: Absorptie van cytosolisch enzym LDH bij 340 nm in verschillende fractie
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller michelleweesie. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $3.77. You're not tied to anything after your purchase.