Celbiologie
1.Techniek
inleiding
Stabiele cellijnen: afkomstig van tumoren -> immortalisatie
Contactinhibitie van celproliferatie van mitogenen
Adherente cellen splitsen:
=> trypsine: oppervlakte eiwitten splitsen
=> EDTA: calcium en magnesium losmaken
Totipotent: eerste uren na bevruchting, kan zich tot foetus ontwikkelen
Pluripotent: 4 dagen na bevruchting, blastocyst -> kan niet meer tot foetus
ontwikkelen zonder placenta
Multipotent: specifieke cellen kunnen nog tot verschillende cellen binnen een
bepaald weefsel evolueren. (bloedplaatsjes, rode bloedcellen,..)
Prepareren
Fixeren: afbraakenzymen tegengaan door denaturatie
Bevriezen: snel en behoud epitopen voor kleuring, in LM
Chemische fixatie: door formol of glutaraldehyde, betere morfologie
Veranderingen die gebeuren tijdens fixatie = artefacten
Inbedden: hard maken om te kunnen snijden
Niet bij koudefixatie
Meestal hydrofoob -> eerst water verwijderen uit cel door alcohol
Harsen zijn hydrofoob met hydrofiele groepen op -> minder stabiel
Paraffine, harsen en plastics
Snijden:
Met paraffine: voor LM, zacht coupes (5-10 micrometer)
Microtoom mes uit staal
Harsen, plastics: voor EM, hardere coupes (60-70nm), minder immuun kleuring
Microtoom mes uit glas of diamant
, Microscopen
microscoop kleuring werking
Klaarveldmicroscoop PAS = vrij suikers Breken licht
200nm aankleuren Condensor, objectief en oculair
Hematoxyline: base
Eosine: zuur
Fasecontrastmicroscoop Ongekleurde Kleine faseveranderingen door
Voor levende cellen preparaten kleine brekingsverschillen in
preparaat
Fluorescentiemicroscoop Fluorescerende Epifluorescentie: excitatielicht
kleurstoffen = korte golflengte
fluorochromen Emissie lange golflengte
Ion-gevoelige Door kwiklamp
kleurstoffen: conc Confocale laser scanning
ionen microscopie (CLSM)
Immunofluorescentie:
specifieke eiw, mbv
antilichamen
Tagging: specifieke eiw in
levende cellen
4D door time lapse
Flowcytometrie: techniek voor
tellen cellen
Transmissie Elektronen Negatieve kleuring Elektronenverstrooiing
microscoop (TEM) Zware metalen bv Zware atomen
1nm osmium: Ultradun preparaat
donker/licht Hoog vacuüm
contrast Vooral om binnenkant
Shadowing en rotary objecten te zien
shadowing: platina en
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller detantloena. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $7.37. You're not tied to anything after your purchase.