Summary
Samenvatting moleculaire biologie TECHNIEKEN
- Course
- Institution
- Book
Samenvatting van moleculaire biologie technieken deel.
[Show more]
Connected book
Book Title:
Author(s):
- Edition:
- ISBN:
- Edition:
More summaries for
-
Molecular Biology of The Cell, 7th Edition
-
Summary Molecular Biology of the Cell 2 (book) (WBFA007-04)
-
Summary Regenerative Medicine
3 reviews
By: khalidsabir • 4 year ago
By: tamaravdbunt • 5 year ago
By: jelleve01 • 5 year ago
Seller
Followvandam7
Reviews received
Content preview
Les 1 Algemene DNA techniekenRestrictee ncleases
Bijedeerecombi a teeDNAetech ologieeworde edee atnnrlijkeee zymatschee rocesse e
agebootstei ehetelabeome ienwee( iet- atnnrlijke)ecombi atese a eDNAeteecreëre .
Hier ooreworde ee zyme egebrnikt,ee zyme eworde egebrnikteomdatezeezorge e ooreee e
oors elbare,es ecifekeeacteedieeookemakkelijkere erkrijgbaarezij .
Ereworde e erschille deee zyme e oore erschille dee rocesse egebrnikt.
K i e e->e nclease
Bewerke e->eei d-modifcere deee zyme
Plakke e->eLigase
Ko iëre e->eDNAe olymerase
Restrictee nclease eworde egezni erdenit
bacterië .eDeefn ctee a edezeee zyme ei
bacterië eiseheteo schadelijkemake e a
iraaleDNA.eAlleebacteriestamme ehebbe
n iekeerestricteee zyme ,eerezij emeereda
3000e erschille deebeke dewaar a e600
commercieele erkrijgbaarezij .
Deegrotee erschille etnsse e ncelase ezij
deeexo nclease,edieek i te a nitehet
nitei dee a edeestre gee edeee do nclease,
dieek i tei ehetemidde e a edeestre g.
Naasteexo-ee ee do ncleasesebestaa eereook;eDNAee eRNAe ncleases,ess/dse ncleases,e
s ecifekeee eas ecifekee ncleases.
Ty eeIIerestricteee zyme ezij ezoes ecifekedatejeewa eeredeeDNAeseqne teebeke deiseexacte
kn te oors elle ewaarehetee zymegaatek i e .
Elkerestricteee zymeiseee en iekeecombi atee a eee eherke i gsseqne teee edeema iere
a ek i e .eOmdatedeemeesteerestricte-e zyme ewerke ealseee ehomodimeer,ehierdoore
erto e eherke i gssiteebij aealtjdeee eomgekeerdeesymmetrieeofwele ali droom.eDiteisetee
herke e eo e1estre gewa eere a nitehetemidde edeeseqne teecom leme taireli kseise
t.o. .e a erechts.
Ee erestricteee zymek i te aakebi e edeeherke i gsseqne te,emaaresommigeek i e e
hierebnite .eDaar aastekn e edeee zyme eo etweeema ierek i e ,estckyeofebln t.
Ee e oorbeelde a eee ebln tek i :
+
,Ee e oorbeelde a eee e5’e(bo e )ee eee e3’e(o der)estckyek i :
Isoschizomere ezij e erschille deee zyme emetedezelfdeeherke i gsseqne teee edezelfdee
ma iere a ek i e ,editewordtegebrniktewa eereéé e a ebeideegeschiktereise ooredee
gekoze ereacteco ditese(bnfersame stelli g).
Neo-isoschizomere ezij e erschille deee zyme edieedezelfdeeherke i gsseqne teehebbe e
maareee e erschille deema iere a ek i e .
Ligase
Fragme te emetedezelfdeeo erha gekn e emeteelkaare erbo de eworde ,ehierewordteooke
gebrnike a egemaaktetjde sedeerecombi a teeDNAetech ologie.eHierbijezorgteeersteee e
restricteee zyme oorehetek i e e a edeesniker-fosfaatebackbo es,edaar aewordteee eDNAe
fragme te a eee ea deremolecnnletoege oegd.eAlselaatsteezorgteligasee ooredeeslnit ge a ede
stre ge .
Ligaseeherstelte ormaalei eDNAefosfodiesterebi di gewa eeredezeebreektetjde edeere licatee
e /ofedeere arate,ei e i oewordtedeeligateeo erehetealgemee ebijee kelstre gsegedaa .
I e itroewordtedite roceseo erehetealgemee ebijednbbelstre gseDNAegedaa .
Deenitei de e a efragme te emoetetoe alligebotse e oordateligaseeka ewerke .eLigaseewerkte
ookemi dereefcië tebijebln teei de eomdatedeefragme te e ieteo derli gewaterstofrngge e
aa gaa .eBijestckyenitei de etreedtea eali geo eofweledee ormi ge a ewaterstofebrngge e
tnsse e erschille deefragme te ,ehierdooreheefeligaseemeeretjdeometeebi de ewatezorgte
ooreee ehogereeka seo esncces.
Ki aseee eFosfatase
Ki aseeiseee e erzamel aame ooreee egroe ee zyme edieeee efosfaatgroe eka eaa bre ge e
o eee ea dereeeiwiteofemolecnnl.
Fosfataseeiseee ee zymedatefosfaatgroe e e a e erschille deemolecnle eka e erwijdere .
, Oefening
Be aaledeeo erha g.e5’/3’/bln t,ee ekn e edeenitei de emeteelkaar?
Hierbijegeldte->e5’eallee emete5’e3’eallee emete3’ebln teallee emetebln t
Voorbeeld:
1.eG/GATCCee e2.eTC/GATCGA?eBeidee5’
Bo e stee5’->e3’eo derstee3’e->e5’,ealtjdegeschre e e a e5’->3’
1.e5’eGe–e3’eeeeeeeeeeee2.e5’eTCe–e3’eee
eeee3’eCCTAGe5’eeeeeeeeee3’eAGCTAGe5’
Combi ate:e1+2=e5’eGGATCGAeeee2+1=e5’eTCGATCC
eeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeee3’eCCTAGCTeeeeeeeeeeeeeee3’eAGCTAGG
DNAeisolate
DNAeka e erme ig nldigde(am lifcate)eworde edoorebacterië ,ePCReofesy thesee a eDNA.e
Bijedeeam lifcateedoorebacterië ,ewordteee e lasmideDNAegebrniktealseklo eer ector.e
(Vector=drager)ePlasmideiseee eklei ecircnlairebacterieeleDNAedateo afa kelijkeise a ehete
chromosomaleeDNA.
Deegehelee rocednree a edeeklo eri gebegi tebijehetei bonwe e a ei serte(DNA)ei eee e
ectored.m. .erecombi a teDNAetech ologie,edaar aewordteee egastheercelegetra sformeerd
meteee e ector.eDezeegastheercelegaatedele ee eookedeei sertebe ate dee ectorere licere .e
Deelaatsteesta eisedeeisolatee a e lasmide e(mi i re ).
PlasmideDNAewordtegezni erded.m. .efe oleextracte:
-eDeebacteriëleecelwa dewordte erzwaktemetelysozymee eEDTA.
-eDaar aeworde edeecelle egelyseerdemeteSDSee eNaOHe( He12).eNaOHezorgte oorehete
erzachte e a edeecelwa dee edatehetedsDNAessDNAewordteookewel:ede atnrate.eNaasteDNAe
zorgteheteooke ooredeede atnratee a edeemeesteeeiwite ewatehel tebijehetelateres litse e a e
lasmideeeiwite .
-eHetelysaatewordtedaar aege entraliseerdemetekalinmacetaat.eHiereka edeessDNAeternge aare
dsDNA,editeisesim ele ooredeeklei ee lasmideemaareo mogelijke oorehetegDNAedite ormteda e
ee e ro editemakkelijkegescheide eka eworde e a ehete lasmideeDNAedoorece trifngere .
-eFe oleextracte
-eEtha ole reci atee(zorgteer ooredatezonte ei teracteseaa ekn e egaa emete egatefe
gelade efosfaatewaardoorehete olariteite erliestee edaardooredeeo losbaarheidei ewater.
BijeRNAeisolateeisebela grijkedateRNAezeerei stabieleisee eRNaseejnistezeerestabiel.
Daaromemoetegeleteworde eo :
-eO middellijke aeisolatee(orgaa eb )es a efreezee a esam lesei e loeibareestkstof.
-eTRIZOLe(i itroge )estabiliseerteRNAetjde sehomoge isate.
-eDEPCeaa eo lossi ge etoe oege eomeRNaseeteei act ere .
-eHomoge isere /lysere ei eaa wezigheide a eRNaseeremmers.
-eO slaa ei e–e80e°Cebijeetha ol.
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller vandam7. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $3.21. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
72042 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now