Proteïnen en het proteoom
Welke eiwitten zijn er tot uitdrukking gebracht in die cellen? Welke mix eiwitten zijn er in die cel? (=
proteoom). Iedere celkern bevat genetische info voor alle mogelijke eiwitten in het lichaam. Alle
proteinen die tot uitdrukking gebracht wordt in een cel = proteoom
Scheiden van proteïnen
In melk zijn er heel veel verschillende eiwitten. We gaan ons richten op het scheiden van eiwitten
obv, grootte, lading oplosbaarheid en specifieke bindingscapaciteit. Vaak willen we eiwitten
analyseren.
Wat we terug vinden aan eiwitten verandert ifv het soort cel, het verandert ifv onze ontwikkeling, ifv
omgevingsfactoren (bv. Op hoogte stage), ifv hormonen.
We moeten proteïnen kunnen afzonderen dmv scheidingstechnieken die gebaseerd zijn op de
eigenschappen van de eiwitten.
Centrifugatie
Eerst gaan we centrifugeren: scheiding obv massa. Als we dat verschillende keren doen zal men een
neerslag bekomen (=pellet) en een supernatan (water in vloeistof boven pellet zit). We gaan
verschillende elementen uithalen door te variëren in snelheid.
En afh van wat we willen bekijken gaan we in bepaalde fracties eiwitten willen afzonderen.
Eiwitten apart krijgen
Uitzouten:
Eiwitten gaan bij bepaalde zoutconcentratie neerslaan. Als we het neerslag behouden en deze weer
uitzouten dan bekomen we andere componenten. Ook bij te zoute oplossing kan met bepaalde
eiwitten denatureren en zelfs breken. De eiwitten gaan neerslaan omdat ze door ionsterkte van het
zout niet meer hun tertiaire of quaternaire structuur gaan hebben.
Dialise:
Scheiden obv een verschil in grootte. We doen dat over semipermeabel membraan. De kleine
moleculen kunnen door het membraan, grotere moleculen zoals eiwitten kunnen er niet door. De
dialise gebeurt door de osmotische gradiënt. Dit kan je maar doen door het verschil aan concentratie
( door het aantal deeltjes en niet door de grootte van de deeltjes). Om evenwicht te bekomen moet
er even veel deeltjes zijn aan wederzijde van het membraan zijn, ze hoeven niet enkel grote of kleine
moleculen. Door vloeistof te verversens kunnen we ervoor zorgen dat alleen de grote moleculen
binnen blijven. Scheiden ifv de grootte obv de osmotische gradient. = dyalise
Gel filtratie chromatografie:
Zien vaak gekleurde fracties in kolom. Kolom wordt gestapeld met grijze
korrels die een opening hebben. Die openingen kunnen variëren. Als we daar
dan een mengsel opleggen van moleculen met verschillende grootte , dan
zullen de grote moleculen het eerst uit te kolom komen. Elusievolume
(hoeveel buffer men op kolom moet gieten vooraleer er iets uitkomt), is het
1
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller emiliea. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $8.57. You're not tied to anything after your purchase.