Summary
Samenvatting Leereenheid 6: Te kennen uit ppt & padlet
- Course
- Institution
Samenvatting van leereenheid 6
[Show more]
Seller
Follow
carolinelaevaert
Reviews received
Content preview
LEH 6 – DNA TechnologieTE KENNEN UIT PPT & PADLET ✔️= 100% zeker (bv. antwoord uit padlet, …)
LEERDOELEN:
Kort kunnen uitleggen: (basisprincipes) De verschillende methodes die gebruikt worden bij:
o onderzoek naar DNA
o wijzigen van DNA
maar vooral:
o de doelstelling van de verschillende methodes zeer goed begrijpen
o en de opportuniteiten die daaruit voortvloeien kunnen uitleggen (toepassingen cf. LEH 7)
Opmerking Devos in les: Belangrijkste die je moet begrijpen: (Gel)elektroforese, PCR + PCR DGGE, Real-time PCR
RECOMBINANTE DNA TECHNOLOGIE
1. Wat is de doelstelling van gentechologie?
Genetische kenmerken ve organisme:
wijzigen of
overbrengen naar ander organisme
2. Wat zijn restrictie-enzymen
‘Scharen’ die kenmerk uit genetisch materiaal ‘knippen’
(= voluit restrictie-endonucleasen) woord dat eindigt op ‘ase’ altijd enzym / endo = midden ze knippen in het midden
3. Wat is de oorsprong van de restrictie-enzymen?
Bacteriën: gebruiken restrictie-enzymen als bescherming tegen bacteriofagen
↪️knippen DNA v hun belagers stuk. Restrictie-enzymen uit bacteriën isoleren
4. Wat is recombinante DNA technologie?
= wijziging in DNA induceren (ipv spontaan = mutatie)
Bepaald gen wijzigen of overbrengen naar ander organisme
= knip- en plakwerk:
Endonucleasen (knippen) = restrictie-enzymen oorsprong bacteriën
Ligase (plakken)
In een grote DNA-molecule kan de herkenningsplaats ook > 1 keer voorkomen > 1 keer knippen
5. Leg recombinante DNA technologie uit adhv de werking van een restrictie-enzym (bv. EcoRI)
Restrictie-enzymen isoleren uit bacteriën
DNA 1 en 2 geknipt met restrictie-enzym op herkenningsplaats (dus complementaire sticky ends)
Sticky ends hybridiseren met DNA-ligase
= vorming v recombinant DNA molecule
, 6. Oefening: Knip onderstaande moleculen met restrictie-enzym Pst I (cf. Fig. 63)
en creëer uit de ontstane fragmenten twee recombinant DNA moleculen
Molecule 1 Molecule 2
GCTCTACTGCAGTTAC ATGCTGCAGCCA
CGAGATGACGTCAATG TACGACGTCGGT
HOE OPLOSSEN?
1. Zoek herkenningsplaats
2. Knip met restrictie-enzym
3. Combineer de juiste fragmenten
4. Plak met DNA-ligase
OPLOSSING
ELEKTROFORESE VAN DNA
7. Wat is (gel)elektroforese van DNA?
= visualiseren v DNA
↪️DNA fragmenten scheiden op grootte in agarose gel
Bv. als check: Is het knippen gelukt? Is het plakken gelukt? Is er een recombinant DNA molecule van gemaakt?
Bv. voor het identificeren v bacteriën (= vb v toepassing)
Bv. is PCR-reactie goed verlopen?
8. Werking (gel)elektroforese?
(negatief geladen)(bekomen door restrictie-enzymen aan toe te voegen)
DNA-fragmenten bewegen onder invloed v elektrisch veld:
Bewegen in richting v positieve elektrode
↪️Hoe kleiner, hoe sneller
Zijn nu op grootte gescheiden
↪️ Kleurstof in gel: onder UV-licht DNA fragmenten zichtbaar als streepjes
v verschillende grootte ↪️dus visualiseren
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller carolinelaevaert. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $7.27. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
83662 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now