Summary
Samenvatting MCB21T week 5
- Course
- Institution
Compleet overzichtelijke EN gedetailleerde samenvatting van MCB theorie vak BML
[Show more]
Seller
Follow
SeniorScientist
Reviews received
Content preview
H16 Sequentie-analyse volgensMaxam-Gilbert en volgens
Sanger
Sequencen: het bepalen van de volgorde DNA-fragmenten via sequentie-analyse
2 methoden:
Chemische degradatiemethode; ssDNA wordt bij een bepaald nucleotide chemisch veranderd
en vervolgens ter plekke geknipt
Biologisch; door Sanger ontwikkeld. Principe is het specifiek beëindigen van een
polymerisatie van een nucleotidenketen door een didesoxyribonucleotiden
Methode van Maxam-Gilbert: de chemische
degradatiemethode
Het fragment waarvan men de nucleotidenvolgorde wil bepalen, wordt eerst aan de 5’-einde
radioactief gelabeld en vervolgens bij 90 graden met DMSO enkelstrengs gemaakt
In het kort, wat er gebeurd is dat er een label wordt toegevoegd aan de 5’-einde aan een nucleotide.
Dit is voor iedere nucleotide anders. Na behandeling wordt deze op die plaats geknipt. Wat er
ontstaat zijn banden van verschillende lengten. Deze moeten op een PAG gel (ureumhoudende
polyacrylamide-gel) gezet, ureum om te voorkomen dat er haarspeldstructuren vormen. Het
beïnvloed wel de snelheid van dit proces.
De gelabelde fragmenten worden zichtbaar na het belichten ervan. Deze kunnen vervolgens uit de
gel worden geïsoleerd voor verdere onderzoek. De niet gelabelde fragmenten storen niet.
Uitvoering chemische degradatiemethode
Het gelabelde DNA moet in gelijke porties verdeeld worden.
Deze porties moeten voorbehandeld worden om ieder met een verschillende chemische reactie te
behandelen om van ieder ssDNA streng maar één base te verwijderen
Voor nabehandeling wordt piperdine gebruikt. Deze verbreekt de suikerfosfaatketen daar waar de
base verwijderd is
Er zijn alleen reacties specifiek voor G en C’s, en niet voor A en T’s
Interpretatie
Er zijn 4 lanen:
G-laan
A/G-laan
C/T-laan
C-laan
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller SeniorScientist. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $3.74. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
53068 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now