Summary
Samenvatting technieken lEV
- Course
- Institution
Samenvatting van alle technieken met de principes, materialen en methodes
[Show more]
Seller
Follow
metastraathof
Content preview
TECHNIEKEN LEVReinstrijken
Principe: Een bacterie uit een bacteriecultuur isoleren en verdunnen om er vervolgens
zuivere kolonies uit te laten groeien. Hierdoor kun je een mengsel van bacteriën
scheiden tot zuivere culturen die je dan kunt onderzoeken.
Materialen
- 2 öses
- Plaat
- Bacteriecultuur
Methode
Vaste cultuur
1. Beschrijf de plaat
2. Pak met öse 1 bacteriën uit bacteriecultuur
3. Maak vier strepen met de öse
4. Draai de öse om, draai de plaat een kwart slag en maak vier nieuwe strepen, de
eerste twee gaan door de laatste twee van de vorige vier.
5. Pak een nieuwe öse en draai de plaat, maak vier nieuwe strepen eerste twee
door de laatste twee
6. Draai de öse, draai de plaat en maak vier nieuwe strepen eerste twee door de
laatste twee.
Vloeibare cultuur
1. Beschrijf de plaat
2. Doop een öse in de bacterie cultuur
3. Maak met de öse vier strepen op de plaat
4. Pak een nieuwe öse en maak vier nieuwe strepen waarbij de eerste twee door de
laatste twee gaan.
5. Pak een nieuwe öse en maak vier nieuwe strepen waarbij de eerste twee door de
laatste twee gaan.
6. Draai de öse om en maak vier nieuwe strepen waarbij de eerste twee door de
laatste twee gaan.
Seriële verdunning maken
Formule: Vpip = Vnodig/Vf (verdunningsfactor)
Als er minimaal nodig staat, mag je eind volume meer zijn dan dat je nodig hebt. Als dit
er niet staat moet je op het precieze getal uit komen na het pipetteren.
1
,Vnodig is altijd meer dan je eindvolume.
Methode:
1. Bereken Vpip met de formule
2. Vul je buisjes met demiwater (kijk goed naar hoeveel je nodig hebt)
3. Pipetteer stock in buisje 1, meng het door naar de eerste stop te pipetteren
4. Pipetteer Vpip van buisje 1 naar buisje 2, meng het
5. Enzo tot laatste buisje
Parallelle verdunningsreeks
Formule: C1 x V1 = C2 x V2
C1= concentratie stockoplossing
V1= volume aanwezig
C2= concentratie nodig (eind concentratie)
V2= Volume nodig ( eind volume)
Vaak moet je V1 berekenen.
Methode:
1. Bereken wat je nodig hebt volgens de formule
2. Pipetteer elk buisje vanuit de stockoplossing. Pak niets uit een ander buisje!
Kiemgetal bepalen
Formule: Geteld getal x hoeveelheid bacteriesuspensie in ml / verdunning
Ongeldig als geteld getal < 30 of > 300.
Morfologische verschillen
Uiterlijke verschillen op basis van: Grootte, pigmentatie, kolonievorm, rand, hoogte,
oppervlak.
Gramkleuring
2
, Principe: Gramkleuring is een methode om bacteriën te onderscheiden op basis van
hun celwand. Gram positieve bacteriën hebben een dikke laag peptidoglycaan in hun
celwand die de kleurstof in de gramstraat goed vast kan houden, hierdoor kleuren gram
positieve bacteriën paars. Gram negatieve bacteriën hebben een minder dikke laag
peptidoglycaan en nog een buitenmembraan om hun celwand waardoor ze de kleurstof
minder goed vast kunnen houden en uiteindelijk roze kleuren.
Materialen:
- Gramstraat
- Timer
- Brander
- 2 Objectglaasjes
- FZ
- Öses
- Houtenknijper
- Filterpapier
- Micrscoop
- Lensolie
- lenscleaner
Methode:
Gramprepraat
1. Maak twee preparaten van morfologisch verschillende bacteriekolonies van je
reinstrijken zoals in het voorbereidingsfilmpje.
2. Beschrijf object glaasje met naam, klas, datum, welke bacterie gebruikt (vanuit
welke plaat). Doe dit met potlood.
3. Doe met öse FZ op het objectglaasje.
4. Pak met nieuwe öse een losliggende bacterie van de reinstrijk. En verspreid het
over het objectglaasje, dit mag best wel breed.
5. Droog de bacterie door hem ver boven de brander te houden. (met de ruisende
vlam), hou de plaat vast met een houten knijper
6. Fixeer hem door het objectglaasje drie keer door de onderkant van de vlam te
doen. (de blauwe kegel)
Gramkleuring
Kleur het preparaat volgens Gram:
1. Kleur de preparaten 90 seconden in kristalviolet
2. Afspoelen met demiwater
3
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller metastraathof. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $3.23. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
66579 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now