Summary
samenvatting van de volledige cursus analytische biochemie II met bijgevoegde mogelijke examenvragen
- Course
- Institution
samenvatting van de volledige cursus analytische biochemie II met bijgevoegde mogelijke examenvragen
[Show more]
Seller
Follow
linavdlang
Content preview
Analytische biochemie 2Hoofdstuk 1: Analytische performantie, kwaliteitscontrole
en kalibratie
Bespreek de belangrijkste parameters van analytische performantie
1. Aard van de analyse
Kwalitatieve analyse = identificatie, detectie en aantonen van bestanddeel in staal
Kwantitatieve analyse = inwinnen info omtrent de concentratie van een bepaald bestanddeel in
het staal
o Individuele analyse: 1 component
o Groepsanalyse: aantal verwante componenten
2. Specificiteit en selectiviteit
Specificiteit: reactie is specifiek als die enkel opgaat met het bestanddeel dat men wil doseren
=> test moet 100% specifiek zijn
Selectiviteit: test kan ook pos reageren met andere componenten
3. Gevoeligheid of sensitiviteit
Bepaald door de helling van de ijkcurve => hoe steiler de helling hoe gevoeliger
o X-as: concentratie
o Y-as: signaal van de meting
Karakteristieke concentratie soms ook als maar voor gevoeligheid genomen
o Concentratie die nodig is om een meetsignaal van 0,0044 = 1% absorptie te
veroorzaken
4. Detectielimiet en kwantificatielimiet
Detectielimiet of LOD = min concentratie van een stof die in staat is om een sig te veroorzaken
dubbel dan het achtergrondsignaal vaak formule: LOD=3*SD
Kwantificatielimiet of LOQ = min concentratie van een stof die kwantitatief kan worden
bepaald, vaak 10xSD van blanco
5. Accuraatheid
Maat voor afwijking van experimenteel resultaat tov het werkelijke waarde
o Max 5% afwijking
o Analyseren met certificaat voorziene standaardmonsters
6. Precisie
Maat voor reproduceerbaarheid resultaten
Variatiecoëfficiënt = verhouding SD tov het gemiddelde
Standaarddeviatie = afwijking tov het gemiddelde
Voor beste resultaat VC constant en SD zal stijgen bij een hogere concentratie
Intra-variatiecoëfficiënt: gemiddelde afwijking tov van dezelfde run onder dezelfde condities
Inter-variatiecoëfficiënt: gemiddelde afwijking tov verschillende runs onder verschillende
omstandigheden
VC= SD/µ
,Verschil tussen interne en externe kalibratie en wanneer wordt wat gebruikt?
Interne en externe kalibratie zijn 2 methoden die gebruikt worden om analytische instrumenten en
meetapparatuur te kalibreren om zo de concentratie van een onbekende te achterhalen.
Concentratie X en signaal Y
Externe kalibratie
o Directe kalibratie
o Kan worden toegepast als het signaal niet onderhevig is een matrixeffecten
o Éénpuntskalibratie = onbekend signaal vergelijken met bekomen signaal door slechts 1
kalibrator/standaard
Conbekende = (Cstandaard * sig onbekende)/sig standaard
Nadelen:
Accuraatheid afh 1 ijkpunt
Lineariteit op voorhand verifiëren
o Meerpuntskalibratie
Verdunningsreeks van staandaardopl met gekende concentratie (>3)
Eventueel x verdunningsfactor want je moet binnen het bereik van de grafiek
blijven
Bij een niet lineaire relatie:
Lineaire regressie
Log transformatie
Interne kalibratie
o Kan worden toegepast als het signaal onderhevig is aan matrixeffecten en/of methode
en/of meetapparaat het voorwerp is van fluctuerende parameters
Vb reactie matrix
Vb schommelingen T in de vlam
o Standaardadditiemethode
Wnn hoogte van gegenereerde signaal verschilt ten gevolge van een verschil in
samenstelling matrix-standaardopl en matrix-staal of de stalen onderling
Standaard is chemisch identiek aan de te doseren component
Snijpunt met de X-as zoeken
Enkelpunts standaardadditiemethode
Iedere staal met of zonder standaard => verschil in sig is toegevoegde
standaard
Conbekend = (Cstandaard*sig onbekend*Vstandaard)/(Vonbekend*sig
standaard)
Nadelen
o Accuraatheid afh van 1 punt
o Lineariteit vooraf verifiëren
Meerpunts standaardadditiemethode
Voor elk staal verschillende standaardopl
o Voordeel: betere controle lineaire range
o Nadelen:
Tijdrovend
Grote hoeveelheden staal nodig
, o Additie kalibratiemethode
Samenstelling verschillende te analyseren monsters (biologische matrix) geen
effect heeft op het gegenereerde signaal van de stalen onderling
o Methode van de inwendige standaard (IS)
Inwendige standaard is niet chemisch identiek aan de te doseren component
Gelijkend standaard-additiemethode
IS gaat wel de zelfde manipulaties
Berekening concentratie
Wat verstaat men onder de standaard-additiemethode? Voor wat wordt deze methode gebruikt? Wat
zijn de voorwaarden voor de inwendige standaard?
De standaard-additiemethode is een interne kalibratie die toegepast wordt per staal wanneer de
optredende interferentie met de standaard per staal anders is.
Het verschil in signaal is een gevolg van het verschil in samenstelling van matrix-standaard en matrix-
staal onderling.
Enkelvoudige en meervoudige standaard-additie methode: uitleg zie hierboven
Voorwaarden inwendige standaard:
Mag niet voorkomen in het staal
Signaal van IS en onbekende moet op hetzelfde moment gemeten worden
Moet sterk chemisch verwant zijn met het te bepalen element
Signaal van het bestanddeel en IS mag niet samenvallen
Berekening van concentratie
Standaard verschilt chemisch van het te bepalen bestanddeel
o Verschil in gevoeligheid => correctiefactor (responsfactor) invoeren
o Responsfactor voor experiment bepalen: RF=sig x / sig IS bij gelijke concentraties
Systemische fouten leg uit
Aanleiding tot fouten met steeds dezelfde waarde (constante fouten) en/of veroorzaken afwijkingen
in dezelfde richting die binnen zekere grenzen te controleren zijn.
Soorten systemische fouten:
Instrumentele fouten
o Te wijten aan apparatuur
o => voorgaande controle en ijking
Methodische fouten
o Gevolg van de gekozen methode
o Opsporen door 2 meer onafhankelijke methodes te gebruiken
o => verdere studie en optimalisatie van de methode
Persoonlijke fouten
o Skills van de analist
o => training en ervaring + vgl resultaten van verschillende analisten
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller linavdlang. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $12.50. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
81311 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now