Summary
Samenvatting - Moleculaire biologie en DNA technologie
- Course
- Institution
samenvatting gemaakt van de slides in combinatie met de cursus en notities die gemaakt werden in de les
[Show more]
Seller
Follow
laurapauwels1
Content preview
MOLECULAIRE BIOLOGIE & DNA-TECHNOLOGIE
BIOMEDISCHE LABORATORIUMTECHNOLOGIE
Laura Pauwels | Bach 2 | 2023-2024
,H1 : ISOLATIE VAN NUCLEÏNEZUREN
NUCLEÏNEZUREN
STRUCTUUR VAN DNA
- Sequentie geschreven van 5’
naar 3’
- Uiteinden:
5’ => vrije fosfaatgroep
3’ => vrije OH groep
- Anti parallelle strengen
- Waterstofbruggen:
2 tussen A & T
3 tussen C & G
STRUCTUUR VAN RNA
- De 2′ OH in ribose is belangrijk voor de RNA-structuur en functie
- De stabiliteit van RNA-polymeer is veel lager dan die van DNA. DNA is dus
meer geschikt voor langdurige opslag en RNA voor korte termijn functies
- De 2′ OH vergemakkelijkt een reactie die kan breken fosfodiësterbindingen
- Omwille van de 2’-OH in ribose is RNA reactiever en dus minder stabiel
dan DNA.
o DNA → bewaren genetische informatie
o RNA → snelle turnover -> reguleerbaar
- RNA is enkelstrengig
- Kan ook secundaire structuren vormen Vb. Hairpin
- Kan complexe drie-dimensionele
structuren vormen en interacties
aangaan met eiwitten, DNA en
kleine RNA-bindende moleculen Vb.
tRNA
,HET GENOOM VAN EEN PRO- EN EUKARYOTEN
Eukaryoot genoom (cellen die een echte kern hebben Vb. mensen, dieren,
planten, schimmels,...)
o Kern:
Histoneiwitten & nucleosoom
Chromatine & chromosomen (chromosomen zijn de meest
opgerolde vorm van DNA)
chromatine is de actieve vorm
Euchromatine (minder compact en meer actief) &
heterochromatine (meer compact en minder actief)
o Mitochondriën
o Chloroplasten (planten)
Prokaryoot genoom
o Bacteriën verpakken DNA in bacteriële chromosomen en plasmiden
o Bacteriële chromosomen waren ooit vermoedelijk naakt DNA.
Inmiddels is echter bekend dat hun DNA verpakt is vergelijkbaar
met de chromosomen van eukaryoten
o Het belangrijkste bacteriële genoom wordt het
bacteriële chromosoom genoemd
o Het DNA-molecuul is gebonden aan kleine
hoeveelheden eiwit en is gelokaliseerd in een
regio van de bacteriële cel die de nucleoïde
wordt genoemd
o Het bacteriële DNA is negatief super opgerold
en in lussen gevouwen
o De lussen van bacterieel DNA worden op hun
plaats gehouden door RNA’s en eiwitten
, ISOLATIE VAN NUCLEÏNEZUREN
Belang:
I. Zuiver DNA nodig voor enzymatische ‘down stream’ toepassingen
II. Enzymwerking wordt verstoord wanneer DNA niet zuiver is
III. De bewaring van zuiver DNA is veel langer en beter en verhoogt de
stabiliteit
Te beantwoorden vragen
1. Hoe kunnen we cellen openbreken om er DNA uit te isoleren? (cellyse =
homogeniseren van het monster)
Lysemethode is afhankelijk van het staaltype (bloed, haar, weefsels,
organen,…)
Voorbereidende stappen kunnen noodzakelijk zijn (‘pretreatment’)
tijdens de pre-analytische fase (stalen nemen en bewaren)
->hier al een fout
-> kans groot, hoe goed het ook gebeurt, op een fout resultaat
Prokaryote cellen:
o Eencellig, celwand, mucopeptiden
Eukaryote cellen:
o Gisten
Eencellig, celwand, chitine
o Schimmels
Meercellig, celwand, chitine
o Planten
Meercellig, celwand, cellulose
o Zoogdieren
Meercellig, celmembraan
Diversiteit eukaryoten en prokaryoten
-> Verschillen in de cel architectuur
-> verschillende lysemethoden nodig
-> verschillende voorbehandeling nodig
Verschillende opties om aan cellyse te doen:
o Chemisch (Door toevoeging chemische stof)
Detergent
Voorbeeld SDS (sodium dodecyl sulfaat)
Maakt celmembraan kapot door fosfolipiden uit de
celmembraan te gaan halen
Alkalische buffer (NaOH)
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller laurapauwels1. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $4.23. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
56880 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 15 years now