Summary
Samenvatting CEL II partim cytologie
- Course
- Institution
samenvatting CEL II partim cytologie
[Show more]
Seller
Follow
cocquytmathijs
Content preview
CEL II: STRUCTUUR EN FUCNTIES__________________________________________________________________________________
PARTIM CELBIOLOGIE/CYTOLOGIE
__________________________________________________________________________________
HOOFDSTUK 1: PREPARENEN EN OBSERVEREN VAN CELLEN EN WEEFSELS
1. CELLEN
Cellijnen niet echt stabiel
Cellen veranderen doordat ze splitsen
Cultuurcondities:
Cultuurrecipiënten:
Gesloten flessen, rollerflessen in warme kamer, open platen, CO2 oven
Oorsprong van cellen, cellijnen:
Cellen kunnen afkomstig zijn van andere laboratoria, eigen isolatie (primaire culturen) of celbanken
(bijvoorbeeld ATTC)
Groeisubstraten en -procedures
• Substraat (vaak plasticje) beschermt tegen anoïkis en is essentieel voor adherente
celculturen
• in vitro condities vergelijkbaar maken met in vivo situatie
• Cellen hebben soms signalen/stoffen van omliggende cellen nodig, bv. van de moedercel
, • Cellen in cultuur delen tot ze een confluente 2D-monolayer vormen, dan ‘contactinhibitie’
van celproliferatie
➔ Cellen beginnen te splitsen
Tumorcellen kunnen het vermogen van contactinhibitie hebben verloren. Dan kunnen ze in een
groepje/hoopje gaan groeien
MDCK cellen kunnen ook groeien op een medium
Celtransfer van:
• Suspensiecultures:
• Adherente cellen: behandeld met trypsine en EDTA (→ calcium en magnesium)
➔ Cellen komen los van het substraat en van elkaar en worden gesplitst
Het werken met cellen in een laminaire flowbench → steriele omstandigheden
Invriezen in vloeibare stikstof
CO2 oven
Differentiatie in vitro
Differentiatie in cultuur van een myoblast naar een myotube
Stamcel: kan zich voortdurend delen en differentiëren in alle soorten cellen/weefsels
• Totipotente stamcellen: ontwikkelt tot een foetus
• Multipotente stamcellen: kunnen in verschillende celtypes uitgroeien
Embryonale stamcellen → ethisch debat
Geïnduceerde pluripotente stamcellen (iPSCs): cellen worden geïsoleerd en bewerkt → maken van
neuronen, hartcellen, gebruiken voor medische screening
Pluripotente stamcellen in vitro: in vitro organen gemaakt
2. WEEFSELS
Weefsels moeilijk om te snijden → daarom paraffine gebruikt → weefsel wordt vast en makkelijk te
besnijden
Als een weefselstukje uit zijn normale in vivo situatie wordt weggenomen, worden afbraakenzymen
actief wat leidt tot degradatie van het weefsel
, ➔ Afbraakenzymen tegengaan door weefsel te bevriezen of door gebruik te maken van
chemische fixatiemiddelen (bv. cross-linken met formol/formaldehyde). Bewaren van
weefsels met behoud van oorspronkelijke structuur = denatureren van eiwitten
Artefacten = veranderingen die tijdens de fixatie in een weefsel ontstaan en afwijken van de in vivo
situatie
Chemische fixatieven resulteren over ‘t algemeen in een betere morfologie
koude fixatie laat snel doorwerken van materiaal toe en bewaart beter de epitopen voor
immuunkleuringen → bv. in labo
inbedden:
• Inbedmiddel meestal hydrofoob
• Inbedmiddel moet volledig binnendringen in weefsel anders ingebed materiaal dat moeilijk
te besnijden is
• Water moet verwijderd worden zodat de hydrofobe inbedmiddelen kunnen binnendringen
• Gebruik van alcohol om water te verwijderen
• clearing’ mbv tolueen, mengbaar met alcohol en het inbedmiddel
paraffine is vrij zacht, hars en plastics
zijn zeer hard
A. Lichtmicroscoop
Resolutie = 200 nm
Resolutie of oplossend vermogen = de kleinste afstand waarmee twee punten nog net gescheiden
worden weergegeven
, meeste preparaten bekeken met doorvallend
wit licht = helderveld/klaarveld-LM (bright
field)
drie lenssystemen: de condensor, het
objectief en de oculairen
condensor bundelt het doorvallende licht op
het preparaat → bepaalt de resolutie,
kwaliteit en lichtsterkte van het beeld
objectief kijkt met een korte werkafstand
naar het preparaat en vormt een vergroot
beeld
oculair: navergroting + projectie op retina
prisma: buigt de lichtweg
soorten lichtmicroscopen: discussie-microscoop, histologie-microscoop, geïnverteerd
lichtmicroscoop
voorbeeld:
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller cocquytmathijs. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $11.84. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
64450 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 15 years now