Summary
Samenvatting practicum examen histologie
- Course
- Institution
Dit is een samenvatting voor het practicum examen van histologie. Eerste semester, bachelor 1 BMLT Lector theorie: Pascal Dooms
[Show more]
Seller
Follow
amyvanhorenbeeck11
Content preview
Histologie: van biopt tot gekleurde weefselcoupe1 Fixatie
Doel: biopsiefragmenten onderzoeken + cel/weefsel structuren
onderscheiden
Techniek: chemische bestanddelen (EW, V, KH, Z) vastleggen
+ morfologische cellulaire structuren behouden
Effecten:
Preventie van autolyse + putrefactie
- autolyse = afbraak van cellen door enzymen -> tgv lysosomen
- putrefactie = afbraak van weefsels door bacteriële activiteit
-> gepaard met gasformatie
Behouden van cellen/weefsel bestanddelen in zo getrouw mogelijke
toestand
Harden van weefsels
Brekingsindex stijgt
Meer selectieve kleuring
Soorten fixatieven:
Formaldehyde
-> meest gebruikte fixatief
-> gas, oplosbaar in water (40% van zijn gewicht)
-> commercieel verkrijgbaar als formol (40% formaldehyde)
-> meestal 10% formoloplossing (4% formaldehyde)
-> geïncorporeerd in vele andere fixatieven
-> fosfaatbuffer aan toevoegen om oxidatie tegen te gaan
(anders verzuring met vorming van storend formolpigment)
Ethylalcohol (C2H5OH)
-> weinig nut (enkel bloeduitstrijkjes)
-> penetreert traag, verharding duurt lang
-> + andere reagentia (Carnoy’s vloeistof) -> fixatie sneller
-> effecten: - denaturatie eiwitten
- precipatie glycogeen
- lost vetten op
Aceton
-> werking analoog aan ethylalcohol (glycogeen niet goed bewaard)
-> niet meer routinematig gebruikt
Alcoholisch formol
-> bestaat uit: formol + 90% alcohol
-> soms gebruikt voor fixatie KH -> fixatie volledig na 6-8 uur
Carnoy’s vloeistof
-> bestaat uit: 100 % alcohol + chloroform + azijnzuur
-> snelle penetratie, goede kernfixatie met bewaring RER en
glycogeen
-> veroorzaakt belangrijke krimping + vernietigt meeste
cytoplasmatische
elementen
-> fixatie volledig in 1-2 uur (kleine fragmenten al na 15 min)
, 2 Inbedding
Na fixatie moet weefsel verhard worden om te kunnen snijden
soorten inbeddingsmiddelen:
o Inbedding en impregnatie met gelatine (ideaal voor bot)
o Inbedding en impregnatie met paraffine (meeste)
o Inbedding in plasticsoorten (harsen)
Paraffine inbedding:
Stap 1: dehydratatie
-> water wordt uit weefselfragmenten gehaald via alcohol reeks
-> alcohol reeks bestaat uit: serie baden met stijgende alcoholconc.
Stap 2: clearing
-> alcohol en paraffine niet mengbaar dus intermediaire vloeistof
gebruiken die
wel mengbaar is met beide -> ethanol wordt vervangen door
deze 3de vloeistof
(dan wordt het transparant)
-> soorten clearingmiddelen:
- chloroform: duurt te lang
- benzeen: zeer toxisch
- tolueen en xyleen: enkel nog gebruikt voor immunokleuring
-> kleine fragmenten klaar in 30-60 min / grote fragmenten: 2-
4 uur
- NEOCLEAR: vervangmiddel tolueen en xyleen (nu meest
gebruikt)
Stap 3: impregnatie met vloeibaar paraffine
-> paraffine verwarmen tot enkele graden boven smeltpunt (60°C)
-> weefsel wordt hier dan ingebracht
-> door de warmte verdampt neoclear en wordt progressief
vervangen door
vloeibare paraffine
Stap 4: inbedding
manueel:
-> geïmpregneerde weefselfragmenten in blokken gieten
-> weefselstuk met te snijden opp. op bodem van vorm leggen
-> overgieten met vloeibare paraffine
-> snel afkoelen om kristallisatie te voorkomen
-> na harding vorm verwijderen -> klaar om gesneden te worden
paraffinedispensor:
-> geïmpregneerde weefsel in metalen kuipje plaatsen (60°C)
-> door druk op knop: gekende hoeveelheid paraffine bedekt
weefsel
-> metalen kuipje op koelplaat -> paraffine kan inkrimpen
-> blokje kan gedemouleerd worden
3 Snijden van weefsels
Type instrumenten:
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller amyvanhorenbeeck11. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $5.80. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
51056 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 15 years now