Summary
samenvatting histologische onderzoekstechnieken
- Course
- Institution
samenvatting deel histologische onderzoekstechnieken
[Show more]
Seller
Followelisevandehaterd
Reviews received
Content preview
Histologische onderzoekstechnieken1 Inleiding
Celbiologen en histologen: onderzoeken structuur van cellen & weefsels → technische hulpmiddelen
2 Optische principes
2.1 Golflengte
3 belangrijke elementen bij microscopen:
Lichtbron
Specimen
Geheel van lenzen → licht gecontentreerd op specimen
Lichtmicroscoop: rechtsreek waarnemen via oculair/ detector
Elektronenmicroscoop: elektronenbundel via elektromagnetische spoelen → fluorescerend scherm
Specimen/ object: golflengte van licht/ elektronenbundel verstoren
Kleine subcellulaire structuren niet zichtbaar: te klein om golflengte te verstoren
2.2 Resolutie of scheidend vermogen
Interferentie: proces waarbij 2/ meerdere golven door combinatie elkaar versterken/ verzwakken
waardoor finaal een golf ontstaat die het resultaat is van de som van de combinerende golven
Beeld = geheel van additieve/ inhiberende inferentie van golven (= diffractie)
Brandpuntsafstand: afstand tussen de lens &
het punt waarin de stralen convergeren na
passage doorgeen de lens
Angulaire apertuur: helft van hoek α vd
lichtkegel vanuit het specimen doorheen de
objectieflens
Resolutie (r): kleinste afstand tussen 2 punten
waarbij deze punten nog als 2 afzonderlijke
punten kunnen gezien worden
golflengte 0.61 λ 0.61 λ
r= = =
brekingsindex∗sin α n sin α NA
NA= numerieke apertuur
Golflengte zichtbaar licht: 400-700 nm → 450nm bij lichtmicroscoop
Brekingsindex lucht: 1.0
Angulaire apertuur 70° en sin = 0.94
0.61∗450 nm
r= =292 nm
0.94
Verhogen door het medium: vb brekingsindex olie = 1.5
0.61∗450 nm
r= =196 nm
1.5∗0.94
Scheidend vermogen menselijk oog= 0.2 nm → vergroting van maximaal 1000x
2.3 Contrast
Dierlijke weefsels: bijna geen contrast → kleurstoffen (= toxic dus dode cellen)
, 3 De lichtmicroscoop
Baan van het licht:
1. Lichtbron
2. Condensorlens: licht gestuurd & geconcentreerd op
specimen ≠ vergrotingsfactor
3. Objectieflens: vlak boven specimen & vormt primair
beeld
NA bepaalt resolutie & vergroting
4. Oculair lens: primaire beeld opgevangen & vergroot
3.1 Fasecontrast microscoop
Contrast verhogen zonder weefsel te kleuren → levende weefsels
Werking: lichtbundel = verschillende lichtstralen met een gelijke
fase → stralen doorheen object => faseverschil (= nier
waarneembaar voor menselijk oog) → faseverschil omzetten in amplitudewijzigingen (= zichtbaar
voor menselijk oog)
Ring 1: zorgt voor fase
Ring 2: zorgt voor amplitudewijziging
3 soorten afbrekingen:
3.2 Differentieel interferentiecontrast (DIC) microscopie
Dezelfde principes als fasecontrastmicroscopen MAAR DIC microscoop = gevoeliger & 3D aspect door
het schaduweffect
3.3 Fluorescentiemicroscopie
Luminescentie: proces waarbij licht geabsorbeerd
wordt door een molecule waarna deze zelf licht
uitzendt → foton in geëxciteerte status
Excitatielicht: inkomend licht ( kortere
golflengte)
Emissielicht: uitgezonde licht ( langere
golflengte)
Fosforescentie: emissie van licht blijft bestaan na
belichting
Fluorescentie: enkel emissie tijdens het belichten
Photo bleaching: excitatie te lang →
veroorzaakt uitdoving waardoor geen emissie meer wordt
uitgezonden
Fluorescentiemicroscopen: werken met UV-licht → schadelijk voor
het oog
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller elisevandehaterd. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $3.25. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
62555 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now