Dit is een samenvatting van het vak Biochemie, wat gegeven wordt in het 2e leerjaar van de opleiding BML. De samenvatting bevat ook een deel van de praktijk over cytochrome c die ik had. Als laatste bevat de samenvatting alles wat ik nog wist van de toets die ik had gemaakt! Soms met letterlijk de ...
Cellen bestaan uit: vetten, nucleïnezuren, koolhydraten, eiwitten en kleine
moleculen.
Eiwitten zijn: enzymen, structuur (botten), mechanische werking (spieren),
sensoren (reuk), bescherming (immuunsysteem), etc.
Een eiwit = een polypeptide. Aan het ene einde van het eiwit zit een
aminogroep (N-terminus) en aan de andere een carboxylgroep (C-terminus).
Het vouwen van eiwitten wordt bepaald door interacties tussen aminozuren
onderling of met het oplosmiddel. De vouwing is bepalend voor de functie van het
eiwit.
De vouwing kan verstoord worden door: verandering in pH, zoutsterkte, temperatuur of de
aanwezigheid van ureum, guanidine, thiolreagentia, apolaire oplosmiddelen, zware metaalionen of
door oxidatie (met name cysteïne).
Eiwitzuivering bestaat uit:
- Homogeniseren & extractie
o Centrifugeren
Precipitatie (fractioneren)
Chromatografie: gelfiltratie (uitsluitingschromatografie),
ionenwisselaar, affiniteit, hydrofoob.
o Membraanfiltratie
o Vriesdrogen
Homogeniseren: openbreken van cellen d.m.v. osmotische shock (cellen barsten open), freeze/thaw,
enzymatisch indien celwand, potter Elvehjem/ dounchen, vermalen met zand/glaskorrels, French
press (cellen knappen kapot), blender, ultrasoon trillen.
Hierbij moet activiteitsverlies voorkomen worden door bijv. verandering is temperatuur of pH,
oxidatie of de aanwezigheid van zware metalen of vrijkomende proteasen.
Een membraangebonden eiwit moet worden gesolubiliseerd: eerste oplossen uit het membraan
door het gebruik van een geschikt detergens.
Soorten detergentia:
- Triton x-100, Tween en NP-40: milde detergentia. Non-ionic = geen eiwitdenaturatie.
- SDS en cholaat: sterke detergentia. Ionic – eiwitdenaturatie.
Centrifugeren: wordt gedaan om
- Precipitaten te verwijderen
- Specifieke cellen uit suspensies, celorganellen, eiwitcomplexen en membraanfragmenten te
isoleren.
- Met analytisch centrifugeren kan het Mw van de eiwitten bepaald worden.
Methoden van centrifugeren
- Differentiële: Bij wateroplosbare eiwitten worden de organellen opengebroken. Bij
membraaneiwitten wordt gesolubiliseerd. Bij deze vorm van centrifugeren worden de
componenten gescheiden in een supernatant en een pellet.
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller sharonbootsman. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $4.28. You're not tied to anything after your purchase.
