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Réaction Antigène/Anticorps

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  • May 17, 2014
  • 4
  • 2013/2014
  • Class notes
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I) Réaction Ag/Ac

Réaction basée sur la complémentarité de reconnaissance entre l’Ag et l’Ac. C’est une
complémentarité de forme qui se réalise entre le paratope de l’Ac et l’épitope de l’Ag. Le
paratope est constitué des 2 parties variables de la chaine lourde et la chaine légère qui
se font face. Dans ces 2 parties il y a des zones d’hyper complémentarité qui vont
donner de la spécificité à la réaction Ag/Ac.

La partie reconnue sur l’épitope est une forme.

1) Caractéristiques

Cette association est non covalente et donc réversible. Elle est du à 4 types de liaisons
de faible NRJ qui sont (+ forte à + faible) : liaison électrostatique (ou liaison ionique),
liaison Hydrogène (force entre 2 atomes E+ et E-. Stabilisée par la présence d’eau et
diminue ac la T°C), liaison hydrophobe (se forme entre des grpmts chim hydrophobes et
repoussent les mol d’eau. Constitue 50% des types de liaisons), liaison de Van der
Waals (s’établit entre des grpmts qui ont des mvmts bipolaires électriques).

Cette stabilité varie si on diminue la force ionique (dissocie complexe Ag/Ac),
l’osmolarité, le pH.

KA détermine la rapidité de fixation de l’Ac à l’Ag et permet de définir l’affinité.
L’affinité c’est la capacité qu’à un Ac à s’accrocher à un Ag. On a les Ac de faible
affinité (10-3 /-4), les moyennes affinités (10-5/-8) et de forte affinité (10=-10 et 10=-15)

KD = cste de dissociation 1/KA

Avidité : rapidité avec laquelle l’ensemble des Ac s’accrochent sur l’Ag. Elle dépend de
l’affinité de chaque Ac pour les épitopes d’un Ag. Elle est + forte au fur et à mesure de
l’accrochage sur l’Ag, et est supérieure à la somme des affinités de chaque Ac.

2) Applications générales

Dosage Ag : en utilisant des gammes étalons donner des résultats en mg/L

Titrage Ac : résultats en inverse de dilution. Il faut déterminer une valeur seuil (au delà
du seuil => réaction négative).

1re technique : réversibilité de la réaction utilisée pour faire de la chromato
d’immunoaffinité =>technique de purification. Très utilisée pour faire des séparations
d’Ac.

2e technique : marquage permet de visualiser les réactions. Possible via
immunofluorescence ; avec un isotope (radioactif) => dosage ; marquage par des
enzymes : ELISA => milieu liquide, immunoempreinte => milieu solide

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